[发明专利]一种葡聚糖支链度的测定方法

权利要求书

1.一种葡聚糖支链度的测定方法，其特征在于，分别通过单位重量的葡聚糖所生成甲酸的生成量a和与单位重量的葡聚糖进行反应的衍生试剂PMP即3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮的消耗量b进行葡聚糖的支链度的计算；所述单位重量的葡聚糖所生成甲酸量a的计算方法是通过葡聚糖在缓冲溶液中被高碘酸钠氧化，制备葡聚糖氧化待测液，然后利用色谱仪进行测量计算甲酸的生成量a；所述单位重量的葡聚糖与衍生试剂反应，衍生试剂消耗量b的计算方法是通过葡聚糖在碱性溶液中与衍生试剂溶液反应，加入盐酸溶液进行中和反应后利用色谱仪进行测量计算衍生试剂消耗量b；

所述葡聚糖氧化待测液的制备方法是取高碘酸钠溶液与葡聚糖溶液混合后加入缓冲溶液，混合摇匀后置于0-10℃的环境中反应72-240小时，反应结束后即得葡聚糖氧化待测液，其中所述葡聚糖的质量与高碘酸钠的质量之比为1∶0.5～5；

所述对葡聚糖氧化待测液测量计算甲酸的生成量a的计算方法为外标法，通过测得反应液甲酸峰面积与已知浓度对照品峰面积比较，得出待测样品的甲酸浓度和单位重量葡聚糖产生甲酸量，甲酸浓度的单位为ug/ml；

测量所述单位重量的葡聚糖与衍生试剂反应的PMP消耗量b的方法为向单位重量的葡聚糖溶液中加入氢氧化钠溶液、PMP甲醇溶液、混合后水浴70℃反应，冷却至室温后加入盐酸进行中和，稀释后即得待测液；

所述葡聚糖为艾考糊精，所述支链度的计算公式为：支链度＝(a-b)×0.001×163×100％；其中：a为1g艾考糊精甲酸的生成量mmol；b为1g艾考糊精PMP的消耗量mmol；163为1mol单糖分子质量。

2.根据权利要求1所述的葡聚糖支链度的测定方法，其特征在于，所述缓冲溶液为醋酸三乙胺缓冲液、磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、巴比妥盐 缓冲液、tris缓冲液、硼酸盐缓冲液中的任一种。