[发明专利]一种商陆组培快繁方法

说明书

技术领域

本发明涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种商陆组培快繁方法。

背景技术

商陆为商陆科植物，主产河南、湖北、安徽等地，于秋季至次春采挖，切成块或片，晒干或阴干。药材性状：根为纵切戒横切片，大小厚薄不一，外皮黄白色或淡棕色。横切片为不规则圆形，弯曲不平，边缘皱缩，直径3~9cm，厚0.2~1cm；切面浅黄棕色或黄白色，带粉性，形成多个凹凸不平的同心性环纹。纵切片不规则长方形，弯曲或卷曲，长10~14cm，直径1~5cm；质坚硬，不易折断。气微，味甘淡，久嚼麻舌。主要成份：商陆根含多种三萜皂苷，主要为商陆皂苷E，另含甾醇类化合物，商陆毒素，生物碱，抗炎成分加利果酸及降压成分氨基丁酸0.06%。功用主治：逐水，通便，散结、解毒。用于水肿，尿少，腹水胀满，脚气病，喉痹，痈肿，恶疮。目前,国内市场上商陆销量大。因此，合理地开发利用商陆资源,必将产生良好的生态效益、经济效益和社会效益。目前，未见国外学者对商陆进行研究报道,国内在种子萌发、生物量等方面有一些零散的研究，对其无性繁殖技术研究更是未见报道。因此,为促进商陆繁衍生息,建立商陆无性繁殖体系是很有必要的，商陆良种快繁和规模生产发展也具有重要的现实意义和明显的经济效益、社会效益和生态效益。

发明内容

本发明的目的在于提供出一种以带芽茎段为外植体，经过诱导培养、继代培养、生根以及炼苗移栽等过程成功地获得了商陆离体再生植株,建立了商陆的离体快速繁殖技术体系，达到种子种苗纯，繁殖快，成苗率高，生长快速，收益高。

本发明的一种商陆组培快繁方法，其特征在于包括以下的步骤：

（1）诱导培养：采集商陆优株根部当年生幼嫩萌芽条,剪取顶部茎段作为外植体,将外植体先用洗洁精浸泡4h,同时用软毛刷刷洗表面的柔毛,再用自来水冲洗1h，茎剪成1.0cm、带3个腋芽的茎段,在超净工作台上，用75%乙醇溶液中消毒30s，再用0.15%升汞浸泡20min，无菌水冲洗6次，接种至诱导培养基中进行不定芽诱,接种后置于每天光照14小时，光照强度为2000lx，置于培养温度为28℃的条件下培养直至形成不定芽；

（2）继代培养：将步骤（1）培养后长出的嫩芽从基部剪下并转入增殖培养基上进行增殖培养，接种后先在28℃条件下全暗培养4天，然后置于每天光照8小时，光照强度为3200lx，置于培养温度为28℃的条件下培养，每23天继代一次；

（3）生根培养：将步骤（1）或（2）的芽苗长至2cm高时，切割成单芽并接种到生根培养基上进行诱导生根，接种后置于每天光照19小时，光照强度为3000lx，培养温度为28℃的条件下培养至生根；

（4）炼苗移栽：将长至4cm的生根试管苗的培养瓶瓶盖半打开在培养室中炼苗4天后，培养瓶瓶盖全打开在室外于自然光照下炼苗5天后将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，尽量不伤害根部，栽入由泥炭土:黄泥土=1：1混合成的基质中并移栽定植于地块，移栽30天内保持空气湿度82%以上。

步骤（1）所述的诱导培养基为：MS+8.0mg/L 6-BA+4.5mg/L NAA+31g/L蔗糖+8.0g/L琼脂，pH为5.8。

步骤（2）所述的增殖培养基为：MS+1.2mg/L NAA+6.0mg/L 6-BA+30g/L蔗糖+6.0g/L琼脂，pH为5.8。

步骤（4）所述的生根培养基为：1/2MS+3.0mg/L IBA+2.2mg/L ABT₁+31g/L蔗糖+6.0g/L琼脂，pH为5.7。

本发明的优点是：商陆以带芽茎段为外植体，经过诱导培养、继代培养、生根以及炼苗移栽等过程成功地获得了商陆离体再生植株,建立了商陆的离体快速繁殖技术体系，对于商陆良种快繁和规模生产发展具有重要的现实意义，和具有明显的经济效益、社会效益。

具体实施方式

以下实施例是对本发明的进一步说明，不是对本发明的限制。

实施例1