[发明专利]从阳性血分离细菌的试剂和方法及细菌鉴定方法

权利要求书

1.从阳性血中分离细菌的试剂，包括用于溶解来自血液培养物的血液样品中的血细胞的A剂和用于破碎病原菌细胞壁，或，和促进细胞中的蛋白释放的C剂，其特征在于：所述试剂还包括用作清洗剂的B剂；所述A剂为皂素溶液和SDS中至少一种或其它能裂解血细胞的表面活性剂。

2.如权利要求1所述的试剂，其特征在于：按与血液样品的体积比，A剂为5％以上，和/或，C剂为5％以上。

3.如权利要求2所述的试剂，其特征在于：所述C剂包括甲酸和乙腈。

4.如权利要求3所述的试剂，其特征在于：所述甲酸和乙腈的用量相同。

5.如权利要求1-4中任一项所述的试剂，其特征在于：所述试剂还包括D剂，所述D剂为80-100％的甲酸。

6.如权利要求1-5中任一项所述的试剂，其特征在于：将所述试剂做成试剂盒。

7.采用如权利要求1-6中任一项所述的试剂从阳性血中分离细菌的方法，按实施顺序，包括以下步骤：

(1)向阳性血中加A剂混匀，室温静置5min以上；

(2)加入清洗剂B剂，混匀后离心；

(3)取上清液移到一新的离心管中，沉淀细菌,弃上清液；

(4)再次加入清洗剂B剂，洗涤后，取沉淀用于生化鉴定或彻底去除上清液并进行步骤(5)；

(5)加入C剂，机械振荡，短暂离心；

(6)取上清液作为用于质谱鉴定的样品。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于：步骤(2)中，离心条件为@100-1000g，1分钟以上。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于：步骤(3)中，沉淀细菌，弃上清液的操作为：@10000-15000g离心1分钟以上沉淀细菌，弃上清液；步骤(4)中，洗涤后，在@10000-20000g离心1分钟以上时间后彻底去除上清液；步骤(5)中，所述短暂离心是在@10000-20000g离心1分钟以上，得上清液。

10.采用如权利要求1-6中任一项所述的试剂进行血液中细菌鉴定的方法，包括以下步骤：

(1)按照如权利要求7-9中任一项所述的方法，制备用于质谱鉴定的样品；

(2)取样品点样到飞行质谱仪的靶板的孔位上，室温干燥；

(3)覆盖基质于样品上，室温干燥；

(4)采用飞行时间质谱仪进行检测，得到图谱数据；

(5)数据分析：对图谱数据进行分析，得出鉴定结果。