[发明专利]一种北京花楸组织培养方法有效
| 申请号: | 201710936066.5 | 申请日: | 2017-10-10 |
| 公开(公告)号: | CN107466863B | 公开(公告)日: | 2019-04-16 |
| 发明(设计)人: | 孙涛;咸洋;李文清;解孝满;韩义;王艳;鲁仪增;王宁;刘涛;张继良 | 申请(专利权)人: | 山东省林木种质资源中心 |
| 主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 北京一格知识产权代理事务所(普通合伙) 11316 | 代理人: | 滑春生;李魏英 |
| 地址: | 250014 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 北京 组织培养 方法 | ||
1.一种北京花楸组织培养方法,其特征在于:
(1)无菌苗获得:鲜嫩带芽茎段经过处理和杀菌,接至初始培养基上进行培养,所述初始培养基配方为MS+30g/L蔗糖+6.5g/L琼脂粉;
(2)增殖培养:将消毒后的带芽茎段接至增殖培养基中进行增殖培养,得到继代苗,所述增殖培养基为:MS+1.25mg/L 6-BA+0.25mg/L NAA+0.25mg/L IBA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂;
(3)生根培养:将继代苗逐一转入生根培养基中进行生根培养,得到生根苗,所述生根培养基为MS+1.25mg/L IBA+0.05mg/L NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉。
2.如权利要求1所述的一种北京花楸组织培养方法,其特征在于,所述无菌苗获得方法是:于春季3月中旬,剪取北京花楸新抽生的顶部带芽茎段,去尘后,首先用洗衣粉清洗外植体表面,然后用细流水冲洗外植体20~24h,随后将其置于超净工作台上,采用75%酒精处理35s,再用5%次氯酸钠处理9min进行脱毒灭菌,无菌水漂洗3次,最后将其切成0.7~1.5cm带芽茎段,接入初始培养基中培养30d。
3.根据权利要求1或2任意一项所述的一种北京花楸组织培养方法,其特征在于,所述增殖培养基PH值为5.8,所述生根培养基PH值为5.8。
4.根据权利要求3所述的一种北京花楸组织培养方法,其特征在于,所述增殖培养的时间是35d,所述生根培养的时间是35d。
5.根据权利要求4所述的一种北京花楸组织培养方法,其特征在于,所述组织培养快繁方法的培养条件是温度白天25±2℃、夜间18±2℃,光照时长16h,光照强度为3000~5000LX。
6.根据权利要求1所述的一种北京花楸组织培养方法,其特征在于,所述组织培养方法还包括炼苗,所述炼苗:将生根苗移至温室中封口炼苗,5d后去除无菌盖,继续炼苗3d,维持室内湿度50%以上,温度25~30℃,而后继续炼苗15d,所述15d的前5d湿度不低于50%,温度维持在15~30℃。
7.根据权利要求6所述的一种北京花楸组织培养方法,其特征在于,所述组织培养方法还包括移栽,所述移栽:清水洗净根部培养基,将其移栽入经过0.5%高锰酸钾消毒的轻基质容器内,所述轻基质包括草炭、珍珠岩与蛭石,所述轻基质中草炭、珍珠岩与蛭石的比例是6:1:1。
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