[发明专利]一种用于单细胞拉曼测量和激光显微切割的一体化分选装置

权利要求书

1.一种利用单细胞拉曼测量和激光显微切割一体化分选装置进行单细胞拉曼测量和分选的方法，其特征在于，

所述单细胞拉曼测量和激光显微切割一体化分选装置包括拉曼测量和激光显微切割薄膜(1)，细胞点样芯片(2)和细胞回收芯片(3)；所述细胞点样芯片(2)、拉曼测量和激光显微切割薄膜(1)以及细胞回收芯片(3)按顺序叠加，形成一体化对应结构；其中，所述拉曼测量和激光显微切割薄膜(1)包括切割层(1-1)和拉曼镀层(1-2)，所述切割层(1-1)为激光敏感高分子材料，包括PC(聚碳酸酯)、EVA(乙烯-醋酸乙烯共聚物)、PET(聚对苯二甲酸乙二醇酯)、PEN(聚萘二甲酸乙二醇酯)中的一种或多种，所述拉曼镀层(1-2)为低拉曼背景、不透明金属材料，包括铝、银、金中的一种或多种，所述拉曼测量和激光显微切割薄膜(1)用于单细胞拉曼测量和激光切割分选；

所述方法包括：

1)将所述细胞点样芯片(2)与拉曼测量和激光显微切割薄膜(1)的拉曼镀层(1-2)贴合形成点样孔，将组织切片或细胞悬液涂于点样孔中；

2)将所述细胞回收芯片(3)贴合于拉曼测量和激光显微切割薄膜(1)的切割层(1-1)，微柱(3-2)与点样孔位置一一对应形成一体化装置；

3)对单细胞进行拉曼光谱测量，分析单细胞拉曼光谱识别单细胞；

4)打开脉冲激光在识别的单细胞周围进行激光环绕切割，使环绕切割范围内的拉曼测量和激光显微切割薄膜(1)连同单细胞与环绕切割范围外的拉曼测量和激光显微切割薄膜(1)分离；

5)揭开环绕切割范围外的拉曼测量和激光显微切割薄膜(1)及细胞点样芯片(2)，留下环绕切割范围内的拉曼测量和激光显微切割薄膜(1)以及识别的单细胞粘附在微柱上。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述切割层(1-1)厚度为5-50μm，所述拉曼镀层(1-2)能够掩盖切割层的拉曼信号，厚度为10-100nm。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述激光切割分选所采用的脉冲激光波长为266nm-1064nm，激光脉宽为1fs-1μs，激光的能量范围为1μJ-100μJ，激光的脉冲频率为5-16.6kHz。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述细胞点样芯片(2)为透明软质高分子材料，包括PDMS(聚二甲基硅氧烷)、硅橡胶、PVC(聚氯乙烯)中的一种或多种，所述的细胞回收芯片(3)为透明材料，包括硅酸盐玻璃、PDMS(聚二甲基硅氧烷)、PMMA(聚甲基丙烯酸甲酯)中的一种或多种。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述细胞点样芯片(2)的厚度为0.2-2mm，所述细胞回收芯片(3)的厚度为1-5mm。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述细胞点样芯片(2)上设有一个或多个微通孔(2-1)，所述微通孔(2-1)直径为0.5-5mm。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述细胞回收芯片(3)上设有一个或多个与细胞点样芯片(2)上微通孔(2-1)一一对应的微井(3-1)结构，所述微井的直径为0.5-5mm，所述微井的高度为0.5-2.5mm。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述微井(3-1)中含有与微井(3-1)等高的微柱(3-2)，所述微柱(3-2)的直径为0.25-1.5mm。