[发明专利]艾杜糖‑2‑硫酸酯酶的纯化

权利要求书

1.一种包含纯化的重组艾杜-2-硫酸酯酶(I2S)的组合物，所述重组艾杜糖-2-硫酸酯酶具有与SEQ ID NO:1相同的氨基酸序列，

其中所述纯化的重组I2S包含至少70％的对应于SEQ ID NO:1的Cys59的所述半胱氨酸残基至Cα-甲酰甘氨酸(FGly)的转化，

其中所述纯化的重组I2S含有小于150ng/mg的宿主细胞蛋白质(HCP)。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述纯化的重组I2S含有至少75％的对应于SEQ ID NO:1的Cys59的所述半胱氨酸残基至Cα-甲酰甘氨酸(FGly)的转化。

3.根据权利要求1所述的组合物，其中所述纯化的重组I2S含有至少85％的对应于SEQ ID NO:1的Cys59的所述半胱氨酸残基至Cα-甲酰甘氨酸(FGly)的转化。

4.一种包含纯化的重组艾杜糖-2-硫酸酯酶(I2S)的组合物，所述重组艾杜糖-2-硫酸酯酶具有与SEQ ID NO:1相同的氨基酸序列，

其中所述纯化的重组I2S包含至少70％的对应于SEQ ID NO:1的Cys59的所述半胱氨酸残基至Cα-甲酰甘氨酸(FGly)的转化，和

其中所述纯化的重组I2S含有每分子酶至少10％的二磷酸化寡糖。

5.根据权利要求4所述的组合物，其中所述纯化的重组I2S含有每分子酶至少50％的二磷酸化寡糖。

6.一种包含纯化的重组艾杜糖-2-硫酸酯酶(I2S)的组合物，所述重组艾杜糖-2-硫酸酯酶具有与SEQ ID NO:1相同的氨基酸序列，

其中所述纯化的重组I2S包含至少70％的对应于SEQ ID NO:1的Cys59的所述半胱氨酸残基至Cα-甲酰甘氨酸(FGly)的转化，和

其中所述纯化的重组I2S蛋白具有至少40U/mg的比活性，如通过使用肝素二糖作为底物的体外硫酸酯释放活性测定所测定的。

7.根据权利要求6所述的组合物，其中所述纯化的重组I2S蛋白具有至少50U/mg的比活性，如通过使用肝素二糖作为底物的体外硫酸酯释放活性测定所测定的。

8.根据权利要求6所述的组合物，其中所述纯化的重组I2S蛋白具有至少60U/mg的比活性，如通过使用肝素二糖作为底物的体外硫酸酯释放活性测定所测定的。

9.一种包含纯化的重组艾杜糖-2-硫酸酯酶(I2S)的组合物，所述重组艾杜糖-2-硫酸酯酶具有与SEQ ID NO:1相同的氨基酸序列，

其中所述纯化的重组I2S包含至少70％的对应于SEQ ID NO:1的Cys59的所述半胱氨酸残基至Cα-甲酰甘氨酸(FGly)的转化，和

其中所述纯化的重组I2S蛋白具有至少20U/mg的比活性，如通过使用体外4-MUF-SO₄至4-MUF的转化测定所测定的。

10.根据权利要求9所述的组合物，其中所述纯化的重组I2S蛋白具有至少30U/mg的比活性，如通过使用体外4-MUF-SO₄至4-MUF的转化测定所测定的。

11.根据权利要求9所述的组合物，其中所述纯化的重组I2S蛋白具有至少40U/mg的比活性，如通过使用体外4-MUF-SO₄至4-MUF的转化测定所测定的。

12.根据权利要求9所述的组合物，其中所述纯化的重组I2S蛋白具有至少50U/mg的比活性，如通过使用体外4-MUF-SO₄至4-MUF的转化测定所测定的。

13.根据权利要求9所述的组合物，其中所述纯化的重组I2S蛋白具有至少60U/mg的比活性，如通过使用体外4-MUF-SO₄至4-MUF的转化测定所测定的。

14.一种包含纯化的重组艾杜糖-2-硫酸酯酶(I2S)的组合物，所述重组艾杜糖-2-硫酸酯酶具有与SEQ ID NO:1相同的氨基酸序列，其中所述纯化的重组I2S

(i)包含至少约70％的对应于SEQ ID NO:1的Cys59的所述半胱氨酸残基至Cα-甲酰甘氨酸(FGly)的转化，和

(ii)含有平均每分子至少16个唾液酸。