[发明专利]一种靶向沉默AEG‑1基因的siRNA的结构及其抗肺癌用途

说明书

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，涉及一种靶向沉默AEG-1基因的siRNA的结构及其抗肺癌用途。

背景技术

随着全民吸烟、环境污染等问题的日益严峻，肺癌已成为癌症相关死亡的主要病因。据报道，全球每年有130万人死于肺癌，其中，非小细胞肺癌占据了85％，与此同时，肺癌细胞转移(Metastasis)也已成为影响肺癌患者生活质量和决定患者生死的重要原因。因此，深入了解肿瘤的转移过程机制并找到转移相关的治疗靶点与治疗药物成为肺癌治疗的关键。

恶性肿瘤转移的形成涉及肿瘤细胞侵袭、内渗、外渗和转移四个步骤。当肿瘤细胞失去细胞间黏附并获得迁移能力时，便离开原发灶、渗入内皮血管、进入体循环后，外渗定居于远端位点，形成肿瘤细胞的转移。目前，对于转移形成的机制有两种主要假说，分别为：(1)上皮间质转化(Epithelial to mesenchymal cell transition，EMT)假说：上皮肿瘤细胞在接收到周围间质的信号后，转化成具有间质特性的细胞并且可以从周围细胞分离，增加细胞的运动性，从而提高肿瘤细胞的转移能力；(2)肿瘤干细胞假说：肿瘤细胞具有干细胞的性质，即具有自我更新和形成克隆的能力。

上皮间质转化(EMT)过程是在特定的生理和病理情况下，具有极性的上皮细胞，向可在细胞基质间自由移动的间质细胞转化的现象，因此，上皮细胞表型的丧失和间质特性的获得，是EMT发生的主要特征，具体包括：(1)角蛋白为主的细胞骨架转变为波形蛋白为主的细胞骨架，从而转化成纺锤状细胞，而这一过程中间质标志性蛋白，比如波形蛋白Vimentin、α-平滑肌动蛋白和转录因子Snail的表达提高，但也存在EMT发生功能改变而形态并不改变的现象，这种表型的转化使肿瘤细胞摆脱细胞间黏附，从而表现得更具侵袭能力；(2)细胞黏附分子表达减少，导致上皮细胞失去细胞间黏附作用，EMT发生过程中，E-cadherin蛋白表达下降，而N-cadherin蛋白表达提高。

上皮间质转化和肿瘤转移是一个非常复杂的过程，近来的研究显示，miRNAs在上皮间质转化和肿瘤转移的发生过程中起着重要的调节作用。microRNAs是一种大小约18～26个碱基的单链小分子非编码RNA，是由具有发夹结构的约70～90bp大小的单链RNA前体(preRNA)，经过Dicer酶加工后生成，在转录后水平调控靶基因的表达，在肿瘤发生、凋亡及转移中发挥重要的作用，具有多靶点、高效的调控特点，因此，以miRNAs为靶点的治疗策略成为一种新的、多层次、多途径的肿瘤治疗途径。

AEG-1(Astrocyte elevated gene-1，也称为MTDH、LYRIC/3D3)是在研究HIV病毒引起老年痴呆或偏头痛中发现的在星形胶质细胞中上调的基因之一，与肿瘤的凋亡、自噬、转移侵袭、血管生成、耐药性等有着密切的联系。研究表明，AEG-1通过PI3k-Akt、NF-κB，wnt等经典原癌信号通路激活相关原癌基因的表达；Libing Song等人研究表明，AEG-1在肺癌中的过表达中可促进肺癌的恶性发展。AEG-1是一个与炎症和肿瘤都有着密切联系的基因，是研究炎症与癌症关系的一个关键蛋白，在肿瘤的发生发展中有着重要的作用。

因此，需要提供一种靶向沉默AEG-1基因的siRNA，使得AEG-1在调控肺癌转移中起到相应的作用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种靶向沉默AEG-1基因的siRNA，转染该siRNA的靶向AEG-1基因与肺癌细胞转移的能力正相关，可用于抗肺癌药物的制备。

本发明解决上述技术问题的技术方案为：

一种靶向沉默AEG-1基因的siRNA的结构，其siRNA为siRNA1、siRNA2或siRNA3中的一种，其中，

siRNA1的序列为：

靶序列：5'-GTTACCACCGAGCAACTTA-3'，

正义链：5'-GUUACCACCGAGCAACUUAdTdT-3'，

反义链：5'-UAAGUUGCUCGGUGGUAACdTdT-3'；

siRNA2的序列为：

靶序列：5'-CTGACTGATTCTGGTTCAT-3'，

正义链：5'-CUGACUGAUUCUGGUUCAUdTdT-3'，

反义链：5'-AUGAACCAGAAUCAGUCAGdTdT-3'；

siRNA3的序列为：

靶序列：5'-GCCGTAATCAACCCTATAT-3'，