[发明专利]一种磁珠介导分离纯化的多步酶反应方法在审
| 申请号： | 201710814415.6 | 申请日： | 2017-09-11 |
| 公开（公告）号： | CN107653239A | 公开（公告）日： | 2018-02-02 |
| 发明（设计）人： | 王龙;李佩;王煜 | 申请（专利权）人： | 湖南优品司生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/6806;C40B50/06 |
| 代理公司： | 北京轻创知识产权代理有限公司11212 | 代理人： | 杨立,陈振玉 |
| 地址： | 410000 湖南省长沙市高新开发区麓松路*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 磁珠介导 分离 纯化 多步酶 反应 方法 | ||
1.一种磁珠介导分离纯化的多步酶反应方法，其特征在于，包括在从上一步酶反应体系转换为下一步酶反应期间直接将下一步酶反应体系与上一步分离的挂载有核酸磁珠混合的步骤。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：向装有第一步酶反应体系的反应管中加入磁珠悬液，混匀；
S2：第一步酶反应结束后，将所述反应管放置于磁力架上，待磁珠固定后，移除所述第一步酶反应体系；
S3：洗涤所述反应管和所述磁珠，从所述磁力架上取下所述反应管，并干燥；
S4：向所述反应管中加入第二步酶反应体系，混匀；
S5：第二步酶反应结束后，加入磁珠结合液,混匀，重复S2-S4，直至所有酶反应结束；
S6：用洗脱液从所述磁珠上洗脱核酸。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，S1中，添加的所述磁珠悬液的体积为所述第一步酶反应体系体积的0.6-3.8倍。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，S3中，使用70-85％的乙醇洗涤所述反应管和磁珠。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，S3中洗涤2-5次。
6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，S3中在室温下干燥所述反应管及其中的磁珠。
7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，S5中加入的磁珠结合液为PEG/NaCl磁珠结合液。
8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，S5中所加入的PEG/NaCl磁珠结合液的体积为当时的酶反应体系体积的0.6-3.8倍。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其特征在于，所述核酸为DNA或RNA。
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