[发明专利]一种快速检测赛庚啶的免疫定量试纸条及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于体外诊断试剂技术领域，尤其涉及一种快速检测赛庚啶的免疫定量试纸条及其制备方法。

背景技术

赛庚啶(Cyproheptadine，CHD)是一种抗组胺药物，也是一种使H1受体拮抗药，即神经兴奋剂，在临床上用于荨麻疹、过敏性和支气管哮喘等疾病的治疗。赛庚啶具有抗5-羟色胺的作用，可抑制下丘脑的饱觉中枢而刺激食欲增加体重，在畜禽养殖中含有赛庚定的饲料可以促进畜禽类生长和瘦肉率。农业部2010年发布了1519号公告，向社会公布了禁止在饲料、动物饮用水和畜禽水产养殖过程中使用的药物和物质清单，赛庚啶已明确被列入其中。

近年来由于国家对瘦肉精类药物的监管力度不断加大，在利欲驱动下不法分子盯上了既便宜又有促进生长功能的赛庚啶，将它用作为瘦肉精的替代品，在动物饲料和动物饮水中非法添加此药物，由于积累造成动物源性的食品中含有它的残留，人们食用这些食品，会产生乏力、瞌睡、头晕、镇静、呼吸抑制等，由此将对人体的健康产生很大危害。加强对饲料、经济动物尿样的赛庚啶残留检测是保障食品安全重要手段，目前检测食品中赛庚啶残留的方法，主要是液相色谱一串联质谱法(LC/MS/MS)，该方法灵敏度较高，但检测时间长、操作较繁琐、检测成本高，此法仅适合有条件的实验室进行，不适用于养殖业和现场快速筛查。

虽然ELISA检测也能够达到准确检测的目的，但ELISA耗时且需专业人员和在实验室中进行，不能满足快速检测的要求。近年来，检测赛庚啶标记物的免疫检测方法有金标法，所述方法虽然具有快速、准确的特点，但是检测灵敏度不能满足高灵敏度检测的要求。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种快速检测赛庚啶的免疫检测定量试纸条，使该定量试纸条具有较高的灵敏度和准确的检测结果，同时能完成定性和定量的检测。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种快速检测赛庚啶的免疫定量试纸条，包括底板，所述底板由下向上依次设置有样品吸收区、固相标记抗体区、反应区和吸水区，所述反应区设有检测线T和质控线C；所述检测线T包被有赛庚啶完全抗原，所述质控线C包被有羊抗鼠IgG；所述固相标记抗体区固定有荧光乳胶颗粒标记的抗赛庚啶抗体；

所述赛庚啶完全抗原包被的质量浓度为0.2～0.5mg/ml；

荧光乳胶颗粒标记的抗赛庚啶抗体包被的质量浓度0.1～0.3％。

优选的，所述荧光乳胶颗粒标记的抗赛庚啶抗体为每毫升0.1％的荧光乳胶中包含抗体的质量为40～60μg。

优选的，荧光乳胶颗粒中荧光剂为稀土元素铕元素。

优选的，荧光乳胶颗粒标记的抗赛庚啶抗体是将荧光乳胶颗粒与抗赛庚啶抗体通过酰胺键连接。

优选的，所述检测线T上赛庚啶完全抗原的包被的质量浓度为0.3～0.4mg/ml。

优选的，赛庚啶完全抗原由赛庚啶和偶联蛋白通过偶联剂偶联连接得到；所述偶联蛋白包括牛血清白蛋白或卵白蛋白；所述偶联剂为1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺。

本发明还提供了一种所述快速检测赛庚啶的免疫定量试纸条的制备方法，包括下列步骤：

1)将荧光乳胶颗粒标记的抗赛庚啶抗体溶解于缓冲液中，得到稀释的标记抗体，将所述稀释的标记抗体喷涂在固相标记抗体区，喷涂后的标记抗体区进行放在相对湿度小于20％和30～38℃的环境中干燥7～9小时；

2)将赛庚啶完全抗原溶液划线于反应区形成检测线T线，将羊抗鼠IgG溶液划线于反应区的质控区形成质控线C线，将划线的反应区放在相对度湿小于20％和30～38℃的环境中干燥7～9小时；

3)将所述步骤2)得到的反应区贴固定底板中央，反应区的一端依次贴固相标记抗体区和样品吸收区，反应区的另一端再贴上吸水区，切割成条，得到免疫定量试纸条；

其中步骤1)和步骤2)没有时间顺序的限制。

优选的，所述缓冲液为含质量浓度为1％BSA的摩尔浓度为10mM、pH值7.2的PBS溶液。