[发明专利]一种快速检测赛庚啶的免疫定量试纸条及其制备方法在审
申请号: | 201710797243.6 | 申请日: | 2017-09-06 |
公开(公告)号: | CN107688091A | 公开(公告)日: | 2018-02-13 |
发明(设计)人: | 王学生;黄华;黄士新;顾欣;李丹妮;严凤;吴剑平;潘娟;张婧 | 申请(专利权)人: | 上海容晖生物科技有限公司;上海市动物疫病预防控制中心 |
主分类号: | G01N33/558 | 分类号: | G01N33/558;G01N33/533;G01N33/543 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所11569 | 代理人: | 刘奇 |
地址: | 200233 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 检测 赛庚啶 免疫 定量 试纸 及其 制备 方法 | ||
1.一种快速检测赛庚啶的免疫定量试纸条,包括底板,所述底板由下向上依次设置有样品吸收区、固相标记抗体区、反应区和吸水区,其特征在于,所述反应区设有检测线T和质控线C;所述检测线T处包被有赛庚啶完全抗原,所述质控线C处包被有羊抗鼠IgG;所述固相标记抗体区固定有荧光乳胶颗粒标记的抗赛庚啶抗体;
所述赛庚啶完全抗原包被的质量浓度为0.2~0.5mg/ml;
荧光乳胶颗粒标记的抗赛庚啶抗体的包被质量浓度为0.1%~0.3%。
2.根据权利要求1所述的免疫定量试纸条,其特征在于,所述荧光乳胶颗粒标记的抗赛庚啶抗体为每毫升0.1%的荧光乳胶中包含抗体的质量为40~60μg。
3.根据权利要求1所述的免疫定量试纸条,其特征在于,荧光乳胶颗粒包括荧光剂和乳胶颗粒;所述荧光剂为稀土元素铕元素。
4.根据权利要求1~3任意一项所述的免疫定量试纸条,其特征在于,所述荧光乳胶颗粒标记的抗赛庚啶抗体是将荧光乳胶颗粒与抗赛庚啶抗体通过酰胺键连接得到。
5.根据权利要求1所述的免疫定量试纸条,其特征在于,所述检测线T处赛庚啶完全抗原的质量浓度为0.3~0.4mg/ml。
6.根据权利要求5所述的免疫定量试纸条,其特征在于,所述赛庚啶完全抗原由赛庚啶和偶联蛋白通过偶联剂偶联连接得到;所述偶联蛋白包括牛血清白蛋白或卵白蛋白;所述偶联剂为1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺。
7.权利要求1~6任意一项所述快速检测赛庚啶的免疫定量试纸条的制备方法,其特征在于,包括下列步骤:
1)将荧光乳胶颗粒标记的抗赛庚啶抗体溶解于缓冲液中,得到稀释的标记抗体,将所述稀释的标记抗体涂在固相标记抗体区,喷涂后的固相标记抗体区放在相对湿度小于20%和30~38℃的环境中干燥7~9h;
2)将赛庚啶完全抗原溶液划线于反应区形成检测线T线,将羊抗鼠IgG溶液划线于反应区形成质控线C线,将划线的反应区置放在相对湿小于20%和30~38℃的环境中干燥7~9小时;
3)将所述步骤2)得到的反应区固定底板中央,硝酸纤维膜的一端依次贴固相标记抗体区和样品吸收区,反应区的另一端贴吸水区,切割成条,得到免疫定量试纸条;
其中步骤1)和步骤2)没有时间顺序的限制。
8.根据权利要求7所述制备方法,其特征在于,所述缓冲液为含质量浓度为1%的BSA,摩尔浓度为10mmol/L、pH值为7.2的PBS溶液。
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