[发明专利]一种评价烟草主流烟气诱发炎症反应用动物体外气管模型建立方法、评价方法

说明书

本发明涉及一种评价烟草主流烟气诱发炎症反应用动物体外气管模型建立方法、评价方法，属于卷烟危害评价技术领域。本发明的建立方法，包括如下步骤：1)分离气管环；2)体外培养步骤1)得到的气管环；3)将步骤2)培养后的气管环在烟气冷凝物下暴露1‑24h。评价烟草主流烟气诱发炎症反应的方法还包括：选择评价指标，划分评价标准；评价炎症反应的程度。本发明的方法具有以下优点：1)烟气暴露后气管炎症检测方法的效率高；2)烟气暴露后气管炎症检测方法的具有良好的可重复性，体系稳定准确性高；3)使用范围广：该方法可以适用于卷烟主流烟气、侧流烟气、环境烟气等烟气气溶胶的体外暴露模型。

技术领域

本发明涉及一种评价烟草主流烟气诱发炎症反应用动物体外气管模型建立方法、评价方法，属于卷烟危害评价技术领域。

背景技术

吸烟能引起气管以及肺部的炎症，是慢性阻塞性肺气肿(COPD)首要的危险因素。通过气管的体外实验可初步理解炎症反应的作用机制及过程。烟气冷凝物(cigarettesmoke， CS)在呼吸道造成组织损伤，这种损伤涉及CS诱导的气道疾病和相关肺部疾病的发展，如慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)(Murray LA,Dunmore R,Camelo A,Da Silva CA,Gustavsson MJ,Habiel DM,Hackett TL,HogaboamCM,Sleeman MA,Knight DA.Acute cigarette smoke exposure activates apoptoticand inflammatory programs but a second stimulus is required to induceepithelial to mesenchymal transition in COPD epithelium.Respir Res.2017,18(1):82.)、气道上皮细胞是CS的主要靶点(Cui Y,Liu KW, Liang Y,Ip MS,MakJC.Inhibition of monoamine oxidase-B by selegiline reduces cigarette smoke-induced oxidative stress and inflammation in airway epithelial cells.ToxicolLett.2017, 268:44-50.)。动物模型是研究发病机制和临床防治的基础，同时也是研究的一个难点。啮齿类动物是动物模型的最佳选择，一般常用大、小鼠模型是通过暴露在烟雾等方式造模的 (Smith KR1,Uyeminami DL,Kodavanti UP,Crapo JD,Chang LY,PinkertonKE.Inhibition of tobacco smoke-induced lung inflammation by a catalyticantioxidant.Free Radic Biol Med.2002 Oct 15；33(8):1106-14.Stringer KA,FreedBM,Dunn JS,Sayers S,Gustafson DL,Flores SC. Particulate phase cigarette smokeincreases MnSOD,NQO1,and CINC-1in rat lungs.Free Radic Biol Med.2004Nov 15；37(10):1527-33.)。

然而由于动物实验建立COPD模型周期较长，且影响因素众多，各类研究的结果很难精确地进行比较，是因为缺乏标准化的烟雾暴露和标准化的分析，包括香烟的品种不同、香烟的剂量、研究仪器、暴露设计以及广泛的鼠种系等多种影响因素(烟气加气管滴注博莱霉素制备慢性阻塞性肺疾病大鼠模型及白藜芦醇对该疾病的干预作用及机制研究周敏博士论文2008)，因此非常有必要借助体外模型进一步研究CS染毒后气道炎症的机制。