[发明专利]一种肺基质水凝胶的制备方法及应用及药物在审
申请号: | 201710775034.1 | 申请日: | 2017-08-31 |
公开(公告)号: | CN107496459A | 公开(公告)日: | 2017-12-22 |
发明(设计)人: | 周菁;孙红玉;肖贞良;田坤;陈章;连亨宁;胡绳;李志伟;马李杰 | 申请(专利权)人: | 周菁 |
主分类号: | A61K35/42 | 分类号: | A61K35/42;A61K9/06;A61P1/18;A61P11/00;A61L27/52;A61L27/36;A61L27/50 |
代理公司: | 成都顶峰专利事务所(普通合伙)51224 | 代理人: | 陈钱 |
地址: | 610000 四川省*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基质 凝胶 制备 方法 应用 药物 | ||
1.一种肺基质水凝胶的制备方法,其特征是:包括以下步骤:
将大鼠脱细胞肺组织粉碎,然后按照8mg/ml-12mg/ml比例加入盐酸-胃蛋白酶溶液中,进行溶解;
向溶解后的溶液中加入0.05M-0.15M氢氧化钠和8×PBS-12×PBS调至生理状态,然后置于30℃-40℃条件下直至形成胶状的肺基质水凝胶。
2.根据权利要求1所述的一种肺基质水凝胶的制备方法,其特征是:所述大鼠脱细胞肺组织的制备方法如下:
1)将大鼠全麻后,向全身灌注肝素,取大鼠完整的心肺组织;
2)将套管针经右心室插入肺动脉并固定,设置蠕动泵速度为4-6ml/分钟,使用0.1%十二烷基硫酸钠预充整个灌注管道;
3)依次采用0.1%十二烷基硫酸钠灌注1.8-2.2h,采用去离子水灌注14-16分钟,采用1%Triton X-100溶液灌注8-12分钟,采用添加双抗的PBS灌注70-74小时,直至心肺组织透明,并去除残余的洗涤剂,得到大鼠脱细胞肺组织。
3.根据权利要求2所述的一种肺基质水凝胶的制备方法,其特征是:将大鼠全麻后,采用腹主动脉插管并使用50单位/毫升的肝素向全身灌注。
4.根据权利要求2所述的一种肺基质水凝胶的制备方法,其特征是:蠕动泵采用卡片式蠕动泵,蠕动泵以5ml/分钟的速度将0.1%十二烷基硫酸钠预充整个灌注管道。
5.根据权利要求2任一所述的一种肺基质水凝胶的制备方法,其特征是:
依次采用0.1%十二烷基硫酸钠灌注2h,去离子水灌注15分钟,1%Triton X-100溶液灌注10分钟,添加双抗的PBS灌注72小时,直至组织透明。
6.根据权利要求5所述的一种肺基质水凝胶的制备方法,其特征是:
去除残余的洗涤剂步骤为:采用Dnase溶液灌洗1次后,用生理盐水漂洗3-5次。
7.根据权利要求1-6任一所述的一种肺基质水凝胶的制备方法,其特征是:大鼠脱细胞肺组织粉碎步骤为:将大鼠脱细胞肺组织低温冻干后,再用粉碎机磨成粉末。
8.根据权利要求7所述的一种肺基质水凝胶的制备方法,其特征是:大鼠脱细胞肺组织粉末按照10mg/ml比例加入盐酸-胃蛋白酶溶液中,室温缓慢搅拌至溶解状态,通过加入0.1M氢氧化钠和10×PBS调至Ph 7.4,并置于37℃直至形成胶状的肺基质水凝胶。
9.一种采用权利要求1至8任一所述制备方法制作的肺基质水凝胶在治疗重症急性胰腺炎肺损伤药物中的应用。
10.一种治疗重症急性胰腺炎肺损伤药物,其特征是:包括权利要求1至8任一所述肺基质水凝胶的制备方法制作的肺基质水凝胶。
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