[发明专利]百乐眠胶囊指纹图谱的建立方法

权利要求书

1.一种百乐眠胶囊指纹图谱的建立方法，其特征在于其包括以下步骤：

(1)供试品溶液的制备：取百乐眠胶囊内容物，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积分数为70％-100％甲醇水溶液，称定重量，加热回流30-90min或超声20-40min进行溶解，放冷，用体积分数为70％-100％甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，过0.45μm的微孔滤膜，取续滤液作为供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备：精密称取槲皮苷对照品、2,3,5,4′—四羟基二苯乙烯-2-O-D葡萄糖苷对照品、五味子醇甲对照品、丹酚酸B对照品、大黄素对照品，加体积分数为70％-100％甲醇水溶液分别制成每1mL含65μg槲皮苷、45μg 2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-D葡萄糖苷、48μg五味子醇甲、72μg丹酚酸B、4μg大黄素对照品溶液；

(3)HPLC色谱条件：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料，柱温30℃，流速为1.0mL/min，检测波长为256nm，以乙腈为流动相A，以体积分数为0.1％磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱，流动相A、B的比例变化为：

0～30min，A：B为5％：95％→15％：85％；

30～60min，A：B为15％：85％→22％：78％；

60～70min，A：B为22％：78％→28％：72％；

70～90min，A：B为28％：72％→45％：55％；

90～100min，A：B为45％：55％→60％：40％；

100～105min，A：B为60％：40％→80％：20％；

105～110min，A：B为80％：20％；

110～113min，A：B为80％：20％→5％：95％；

(4)分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液5～20μL，注入高效液相色谱仪，测定，分别得到供试品溶液、对照品溶液的液相色谱；

(5)利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统，经液相色谱数据导入、多点校正和数据匹配，分析得到百乐眠胶囊指纹图谱。

2.根据权利要求1所述的百乐眠胶囊指纹图谱的建立方法，其特征在于其包括以下步骤：

(1)供试品溶液的制备：取百乐眠胶囊内容物1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积分数为70％甲醇水溶液25mL，称定重量，加热回流30min或超声30min进行溶解，放冷，用体积分数为70％甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，过0.45μm的微孔滤膜，取续滤液作为供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备：精密称取槲皮苷对照品、2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-D葡萄糖苷对照品、五味子醇甲对照品、丹酚酸B对照品、大黄素对照品，加体积分数为70％甲醇水溶液分别制成每1mL含65μg槲皮苷、45μg 2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-D葡萄糖苷、48μg五味子醇甲、72μg丹酚酸B、4μg大黄素对照品溶液；

(3)HPLC色谱条件：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料，柱温30℃，流速为1.0mL/min，检测波长为256nm，以乙腈为流动相A，以体积分数为0.1％磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱，流动相A、B的比例变化为：

0～30min，A：B为5％：95％→15％：85％；

30～60min，A：B为15％：85％→22％：78％；

60～70min，A：B为22％：78％→28％：72％；

70～90min，A：B为28％：72％→45％：55％；

90～100min，A：B为45％：55％→60％：40％；

100～105min，A：B为60％：40％→80％：20％；

105～110min，A：B为80％：20％；

110～113min，A：B为80％：20％→5％：95％；

(4)分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液5μL，注入高效液相色谱仪，测定，分别得到供试品溶液、对照品溶液的液相色谱；

(5)利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统，经液相色谱数据导入、多点校正和数据匹配，分析得到百乐眠胶囊指纹图谱。

3.根据权利要求1～2中任意一项所述的百乐眠胶囊指纹图谱的建立方法，其特征在于所述色谱柱采用C18色谱柱。

4.权利要求1～2中任意一项所述的百乐眠胶囊指纹图谱的建立方法在百乐眠胶囊的质量检测或质量控制中的应用。