[发明专利]一种用于成人神经胶质瘤诊断的双抗体夹心法ELISA试剂盒

说明书

本发明公开了血清CCKBR在作为神经胶质瘤诊断标志物方面的应用，以及一种神经胶质瘤的双抗体夹心法ELISA诊断试剂盒。本发明公开了一种新的诊断神经胶质瘤的生物标记物，尤其是对于神经胶质瘤的早期预警和早期诊断，具有特别重要的作用和临床应用价值。同时，还建立了一种基于双抗体夹心原理的酶联免疫诊断系统，并开发成神经胶质瘤诊断试剂盒，可以快速准确地进行CCKBR的检测，可以对各期（特别是早期）原发性神经胶质瘤作出快速的辅助诊断，具有重要的临床应用价值。而且该试剂盒具有操作简单、试剂稳定、重复性好、特异性强、敏感性高等优势，易于大范围推广应用的广阔市场前景。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域。更具体地，涉及一种用于成人神经胶质瘤诊断的双抗体夹心法ELISA检测方法及试剂盒。

背景技术

术语“神经胶质瘤”是指起源于神经胶质细胞的肿瘤，包括星形细胞瘤、少突神经胶质瘤、寡星状细胞瘤和室管膜瘤等。神经胶质瘤是最常见的原发性颅内肿瘤，WHO中枢神经系统肿瘤分类将胶质瘤分为Ⅰ～Ⅳ级，其中Ⅰ、Ⅱ级为低级别胶质瘤，Ⅲ、Ⅳ级为高级别胶质瘤。胶质瘤可以按肿瘤发生部位、细胞形态、排列方式、分化特征、免疫表型、超微结构和分子遗传学改变进行病理诊断和分类。

组织形态观察仍然是病理诊断的基础，但对胶质瘤进行分子生物学标记是现代诊断病理学的重要进展。2016年最新版《WHO中枢神经系统肿瘤分类》颠覆性地改变了胶质瘤传统形态学分型方法，并第一次以分子分型作为肿瘤分型的核心依据，基因型结合表观型的新分型方法增加了诊断准确性，可以更好判断患者预后，精准指导治疗。当然，我们同时必须清楚现有生物学标志物并不是特异或专门针对某一种类肿瘤，随着科学技术发展一定会有更多生物学标志物，因此在临床诊断时，应使用多种生物学标志物进行综合评估。

另外，目前神经胶质瘤的诊断多依赖于影像学技术，无法实现早期预警。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有神经胶质瘤诊断技术的缺陷和不足，提供了一种新的神经胶质瘤诊断标志物，即人类胆囊收缩素B受体（cholecystokinin Breceptor，CCKBR）。本发明研究发现，血清CCKBR水平是神经胶质瘤一个较好的检测指标，可以作为神经胶质瘤临床辅助诊断手段，特别是对于神经胶质瘤的早期（I级神经胶质）发病预警和早期诊断，也具有特别重要的作用和临床应用价值。

本发明的目的是提供血清CCKBR在作为神经胶质瘤诊断标志物方面的应用。

本发明另一目的是提供一种血清CCKBR的双抗体夹心法ELISA检测方法及其试剂盒。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

人类胆囊收缩素B受体（CCKBR）位于染色体11p15.4，全长12454bp，mRNA长度2206bp，有5个外显子和4个内含子。该受体主要存在于中枢神经系统和消化系统，调节多巴胺并影响大脑神经递质的传递，调节精神焦虑、运动和摄食。本发明人通过检测正常人和神经胶质瘤患者血清中CCKBR的含量，通过统计学分析CCKBR含量与神经胶质瘤的相关性发现，血清CCKBR水平是神经胶质瘤一个较好的检测指标，特别是对于神经胶质瘤的早期预警和早期诊断，为该疾病的临床血清学早期诊断找到了一种新的生物标记物。

因此，血清CCKBR在作为神经胶质瘤诊断标志物方面的应用，以及血清CCKBR在作为神经胶质瘤发病早期预警和/或早期诊断标志物方面的应用，均应在本发明的保护范围之内。

本发明提供了一种神经胶质瘤诊断试剂盒，包含人CCKBR重组单克隆抗体。

优选地，所述试剂盒包含有如下组分：

（1）包被在固相96孔酶标板上的人CCKBR重组单克隆抗体；

（2）酶结合物工作液：辣根过氧化物酶（HRP）标记的人CCKBR重组单克隆抗体反应液；