[发明专利]一种同时测定电子烟气溶胶中12种生物碱的方法

说明书

技术领域

本发明属于理化分析技术领域，具体涉及一种同时测定电子烟气溶胶中12种生物碱的方法，所述12种生物碱分别为：烟碱、N-甲基假木贼碱、降烟碱、麦斯明、假木贼碱、β-二烯烟碱、新烟草碱、2,3’-联吡啶、β-二烯降烟碱、可替宁、哈尔碱、烟台林。

背景技术

电子烟，又名电子烟碱传送系统，它能够通过内置雾化器将烟弹中的烟液雾化并将雾化气输送至口腔和肺部，而雾化气中往往含有不同浓度水平的烟碱。出于成本考虑，电子烟烟液中添加的烟碱都是来源于烟草提取。除烟碱外，烟草中还含有其他次要生物碱，在烟草中含量较多、人们研究较多的生物碱主要有降烟碱、新烟草碱、假木贼碱、麦斯明等，这些次要生物碱也具有一定的生物活性，且是烟草及烟草制品中重要致癌物——烟草特有亚硝胺（TSNAs）的直接前体物质。这些次要生物碱由于和烟碱结构有一定的类似性，所以在电子烟烟液中添加的烟碱往往含有一定量的次要生物碱。电子烟气溶胶中的烟碱具有潜在的致瘾性和一定的危害性，烟碱之外的次要生物碱也会对烟碱具有一定的致瘾性增强效应。但是，目前电子烟气溶胶中次要生物碱的研究主要集中在降烟碱、新烟草碱、假木贼碱、麦斯明等，而对其他次要生物碱的研究较少。例如，Trehy等利用高效液相色谱法（HPLC）测定了电子烟气溶胶中的6中生物碱（烟碱、降烟碱、新烟草碱、假木贼碱、麦斯明、β-二烯烟碱，J. Liq. Chromatogr. Relat. Technol. 2011, 34 (14), 1442-1458.）。FDA利用HPLC测定了电子烟气溶胶中的烟碱和可替宁（http://www.fda.gov/downloads/drugs/scienceresearch/ucm173250.pdf）。

所以，为了实现更高通量的生物碱分析要求，我们根据文献调研，对次要生物碱指标进行扩展，最终确定了12种生物碱作为研究对象，并首次建立了GC-MS同时测定电子烟气溶胶中12种烟草生物碱的方法，具体包括烟碱、N-甲基假木贼碱、降烟碱、麦斯明、假木贼碱、β-二烯烟碱、新烟草碱、2,3’-联吡啶、β-二烯降烟碱、可替宁、哈尔碱、烟台林等。

发明内容

本发明的目的正是基于现有技术不足，建立了一种同时测定电子烟气溶胶中12种生物碱的方法。本方法经过一次样品前处理过程即可同时测定目标物中的12种生物碱，具有操作简便、通量高、灵敏度高、回收率及重复性好等优点。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种同时测定电子烟气溶胶中12种生物碱的方法，使用1%的氢氧化钠溶液将捕集有电子烟气溶胶的剑桥滤片中的生物碱游离出来，再用V_二氯甲烷/V_甲醇=4:1的混合溶剂进行液液萃取，以气相色谱-质谱联用法进行测定，内标法定量；具体包括以下步骤：

1）标准工作溶液的制备

分别制备具有5级浓度梯度的烟碱标准工作溶液及具有8级浓度梯度的其他11种次要生物碱标准工作溶液；其中，烟碱的定量采用喹啉作为内标，降烟碱的定量采用降烟碱-2,4,5,6-d₄作为内标，其它次要生物碱的定量采用2,2’-联吡啶-d₈作为内标；

2）样品前处理

将捕集有电子烟气溶胶的剑桥滤片放入50 mL锥形瓶中，再分别加入100 μL内标溶液和5.0 mL1%的NaOH水溶液，震荡混匀后，静置约10 min。然后加入20.0 mL V_二氯甲烷/V_甲醇=4:1，具塞振荡萃取40 min，静置30 min，取下层有机相过0.22 μm有机相滤膜后转移到色谱分析瓶中进行GC-MS分析；

3）气相色谱-质谱分析

利用气相色谱仪配备质谱检测器对所制待测样品溶液和标准工作溶液进行分析，得到相关色谱图；其中，烟碱和11种次要生物碱分析分别采用两种不同的分析步骤；

4）标准曲线绘制及结果计算。

在本发明中，电子烟抽吸模式可为标准抽吸模式（ISO），加拿大深度抽吸模式（HCI）或其他抽吸模式。

本发明更具体的说包括以下内容：

1 标准溶液的配制

1.1 内标溶液的配制