[发明专利]一种Cangrelor中间体腺苷-2-硫酮的高效液相色谱检测方法

说明书

本发明公开了Cangrelor中间体腺苷‑2‑硫酮的高效液相色谱检测方法，它包括以下步骤：a、配制标准溶液；b、采用反向高效液相色谱对标准溶液进行检测；c、按外标法以峰面积计算样品中腺苷‑2‑硫酮的含量。本发明检测方法，可以使腺苷‑2‑硫酮和原料及其他杂质在高效液相色谱仪上得到良好的分离；在0.5～6.0mg/ml内，线性关系良好，R2＝0.9999，平均回收率为102.11％，RSD为2.70％。

技术领域

本发明涉及分析化学技术领域，尤其涉及一种Cangrelor中间体腺苷-2-硫酮的高效液相色谱检测方法。

背景技术

Cangrelor，分子式：C₁₇H₂₅Cl₂F₃N₅O₁₂P₃S₂，CAS登记号：163706-06-7，其化学结构如式A所示；Cangrelor是一种短效血小板P2Y12的可逆抑制剂，此药物主要为了预防成人患者在经皮冠状动脉介入治疗(PCI)过程中因凝血而造成的冠状动脉柱塞。早在2015年3，欧洲药品管理局EMA就已经批准上市，商品名Kengrexal，2016年6月22日，美国FDA批准了Medicine公司的抗血小板药物注射剂Cangrelor上市。

腺苷-2-硫酮是合成Cangrelor的重要中间体，又可称作2-硫代腺苷，CAS登记号为43157-50-2，分子式为C10H13N5O4S，分子量为299.31，淡黄色粉末。英文简称：2-thioadenosine，其化学结构如式B所示；它的同分异构体为腺苷-2-硫醇，其化学结构如式C所示。

一般情况下，腺苷-2-硫酮中不可避免地会存在杂质化合物，检测其中的杂质化合物对于腺苷-2-硫酮产品以及Cangrelor的质量控制具有重要的意义。

高效液相色谱是一种常用的检测方法，它又分为反相高效液相色谱、正相高效液相色谱，由于两者的固定相、流动相等都完全不同，因此它们是两种差异非常大的检测方法，具体而言：

反相高效液相色谱：采用非极性或相对极性较弱的固定相，以极性较强的溶剂作为流动相，常用于分离、检测非极性和极性较弱的化合物；反相高效液相色谱在现代液相色谱中的应用最为广泛，据统计，它占整个高效液相色谱应用的80％左右。

正相高效液相色谱：采用极性固定相，以相对极性较弱的溶剂作为流动相，常用于分离、检测中等极性和极性较强的化合物。

目前，未见有式B所示化合物检测方法的相关报道。

因此，亟需研发一种操作简便、分离度高的式B所示化合物的检测方法。

发明内容

本发明的目的在于提供Cangrelor中间体腺苷-2-硫酮的高效液相色谱检测方法。

本发明提供的Cangrelor中间体腺苷-2-硫酮的高效液相色谱检测方法，它包括以下步骤：

a、配制标准溶液：精密称取0.100g的产品腺苷-2-硫酮，用0.1mol/LNaOH溶液溶解，制成浓度为0.5mg/ml～6mg/ml的溶液，用微孔滤膜过滤，得到标准溶液；

b、采用反相高效液相色谱对标准溶液进行检测，检测条件为：

色谱柱的固定相：表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)的硅胶为填料；

流动相：乙腈和0.3％乙酸水溶液(三乙胺调pH至5.8)(5.2:94.8～5.8:94.2(V:V))；

检测波长：230nm～270nm；

c、按外标法以峰面积计算样品中腺苷-2-硫酮的含量。