[发明专利]锦鲤精子诱导草鱼雌核发育的方法及雌核发育草鱼的应用有效
申请号: | 201710702333.2 | 申请日: | 2017-08-16 |
公开(公告)号: | CN107318719B | 公开(公告)日: | 2020-05-01 |
发明(设计)人: | 刘少军;罗凯坤;王余德;覃钦博;张纯;陶敏;赵如榕;肖亚梅 | 申请(专利权)人: | 湖南师范大学 |
主分类号: | C12N15/06 | 分类号: | C12N15/06;C12N15/02 |
代理公司: | 长沙朕扬知识产权代理事务所(普通合伙) 43213 | 代理人: | 杨斌 |
地址: | 410000 湖南省长沙市岳*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 锦鲤 精子 诱导 草鱼 核发 方法 应用 | ||
1.一种锦鲤精子诱导草鱼雌核发育的方法,包括如下步骤:
(1)将达到性成熟的锦鲤精液用Hank’s液在0~10℃温度下进行稀释,得到的稀释精液平铺于培养皿中形成薄层,然后将培养皿放在垫有冰板的摇床上进行离心处理,控制摇床的转速为90~100r/min,同时用功率为19~20瓦的紫外灯照射5~10min进行灭活处理;所述灭活处理后得到的锦鲤精液遇水激活观察具有60~70%的精子保持活力;紫外灯与摇床的距离为15~17cm;
(2)将所述步骤(1)照射灭活后得到的锦鲤精液与成熟的草鱼头等卵子混合,用羽毛充分搅拌后立刻放入常温水中进行受精2~3min,将得到的受精卵放入冷水中,用羽毛充分搅起让受精卵与冷水充分接触,进行冷处理12~14min;
(3)将所述步骤(2)冷处理后得到的受精卵转入常温的水中进行正常孵化4~5min,再转入水温为23~27℃的水泥槽中进行流水孵化,水流大小以受精卵能在水泥槽中随水流翻动为准,将孵化后得到的有眼脸的鱼苗放到预先培肥的水泥槽中进行前期饲养,再转入土池进行正常饲养,即得到雌核发育草鱼。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,Hank’s液包括以下质量份数的各组分:NaCl 8~8.2份,KCl 0.4~0.45份,CaCl2 0.14~0.15份,MgSO4·7H2O 0.2~0.25份,Na2HPO4·H2O 0.06~0.065份,KH2PO4 0.06~0.065份,NaHCO3 0.35~0.36份,C6H12O6 1.0~1.5份,MgCl2·6H2O 0.1~0.15份以及水1000份,所述锦鲤精液与Hank’s液的质量比为1:3~1:4。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(3)中,前期饲养的时间为90~120天。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)和(3)中,常温水的温度为24~25℃,冷水的温度为3.5~4℃。
5.一种由权利要求1-4中任一项所述方法获得的雌核发育草鱼在研究草鱼性别决定机制领域的应用。
6.一种由权利要求1-4中任一项所述方法获得的雌核发育草鱼在生产抗病草鱼领域的应用,其特征在于,以所述雌核发育草鱼作为母本与普通雄性草鱼进行交配,得到抗病草鱼后代。
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