[发明专利]一组唐氏综合征标志蛋白及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及生化检测领域，特别涉及一组唐氏综合征标志蛋白及其相关应用。

背景技术

唐氏综合征(Down Syndrome，DS)，在小儿常染色体畸变性所导致的出生缺陷类疾病中最为常见的。该病在新生儿中的发病率极高，患者往往表现为先天性智力低下、面容特殊身体发育迟缓，并伴随有先天性心脏病、免疫力低下、白血病等多种疾病，DS患者生活往往不能自理，社会适应和劳动能力较差，给家庭乃至社会都带来了沉重的负担。

该病尚无有效的治疗手段，主要依赖于产前诊断与产前筛查以减少唐氏综合征患儿的出生。然而传统的产前筛查漏检率和假阳性较高。产前诊断如通过羊膜腔穿刺、绒毛膜取样、脐带取血等方法获得胎儿细胞进行培养和进而进行染色体核型分析是产前诊断唐氏综合征的金标准，但均具有创伤性，易导致出血、感染和流产等并发症。因此，寻找新的生物标志物，以开发出一种非侵入性、检出率高的筛查唐氏综合征胎儿的检查方法显得非常迫在眉睫。

发明内容

本发明的目的在于公开一组唐氏综合征标志蛋白及其相关应用。

本发明所采取的技术方案是：

蛋白组合物ERO1L、APCS、OGDHL、NAP1L1作为唐氏综合征检测靶点中的应用。

一组唐氏综合征检测抗体组，抗体组由ERO1L检测抗体、APCS检测抗体、OGDHL检测抗体、NAP1L1检测抗体组成。

一种唐氏综合征检测试剂盒，检测试剂盒中含有能够检测ERO1L、APCS、OGDHL、NAP1L1蛋白的试剂。

一种唐氏综合征检测试剂盒，检测试剂盒中含有能够检测ERO1L、APCS、OGDHL、NAP1L1蛋白相对应基因表达量的试剂。

一种产前诊断试剂盒，诊断剂盒中含有能够检测ERO1L、APCS、OGDHL、NAP1L1蛋白的试剂。

能够检测ERO1L、APCS、OGDHL、NAP1L1的RNA转录水平或/和蛋白表达水平的试剂在制备唐氏综合征检测试剂盒或制备唐氏综合征治疗药物中的应用。

能够检测ERO1L、APCS、OGDHL、NAP1L1的RNA转录水平或/和蛋白表达水平的试剂在制备产前唐氏综合征诊断试剂盒中的应用。

本发明的有益效果是：发明人发现ERO1L、APCS、OGDHL、NAP1L1等蛋白，在怀有唐氏综合征胎儿的孕妇血清中，表达量明显上调，因此该蛋白组合物具有成为唐氏综合征辅助诊断标志物的潜能。

具体实施方式

实施例

1.唐氏综合征胎儿的确诊

选取2013年4月至2014年1月期间到深圳市人民医院以及中国人民解放军第一八一医院进行B超产前检查的孕妇16例，其中7例B超显示所孕胎儿为正常型，9例疑似孕唐氏综合征胎儿。经孕妇及家属知情同意后，采用G显带染色体核型分析技术，对这9例疑似孕唐氏综合征胎儿的孕妇做进一步确诊。具体方法如下：

1)标本采集

脐带穿刺抽取脐带血1mL，置于肝素钠真空管中，立即轻轻混匀。

2)标本接种与培养

用2.5mL注射器向淋巴细胞培养液中滴加混匀后的全血约0.3mL，轻轻摇匀，放入37℃的二氧化碳培养箱中72小时，期间，当培养至第70小时时，用1mL注射器向培养液中加入秋水仙素0.07mL/瓶，摇匀继续培养。(加秋水仙素前注意观察培养基l-清液是否仍清亮，若上清液变混浊，说明标本被污染，应立即重新抽血再次培养。)

3)收集细胞

将培养液转移至15mL刻度离心管中，离心10min(1500r/min)，取出离心管将上清液去掉。沿管壁缓缓加入已预热至37℃的0.075mol/L KCI溶液8mL，吹打悬起沉淀的细胞，置于37℃水浴12min，在低渗溶液中使红细胞溶解，淋巴细胞膨胀、染色体分散。

4)固定

从水浴箱中取出离心管，沿管壁缓缓加入2mL新鲜配制的固定液(甲醇：乙酸＝3：1)，小心混匀，室温静置2min，1500r/min，离心l0min，弃上清液，用吸管轻轻吹打沉淀直至吹打均匀为止，沿管壁缓缓加入新鲜配制的固定液8mL，混匀，室温静置≥30min，重复上述步骤两次。

5)制片

用吸管轻轻吹打管底沉淀的细胞直至吹打均匀，加人适量固定液混匀，从一定高度将细胞悬液滴落在冰玻片上，立即置于75℃烤箱3小时。

6)显带

制好的玻片浸入胰蛋白酶溶液中消化30秒后取出浸入生理盐水，立即取出浸入稀释后的吉姆萨染液中染色约4分钟，自来水冲洗、吹干即可。

7)染色体核型分析