[发明专利]一种大花六道木的组织培养方法

说明书

技术领域

本发明属于植物的组织培养领域，具体涉及一种大花六道木的组织培养方法。

背景技术

六道木(Abelia biflora)是忍冬科(Caprifoliaceae)六道木属(Abelia)植物，原产于我国江西、湖南、湖北、四川等地，是较为珍贵的观赏性花灌木，从半落叶到常绿都有。六道木不仅观赏性好，而且适应性非常强。

大花六道木(Abelia grandiflora)是在六道木中较早出现的园艺种，为六道木的矮化品种，目前国内已有引进，但数量非常有限。它是原产中国的糯米条(A.chinensis)和单花六道木(A.uniflora)杂交而成，后经国外育种，形成了几种更有特色的园艺品种。

大花六道木生长快，株型非常美丽，枝条柔顺下垂，树姿婆娑，无论是作为园中配植，还是用作绿篱和花径的群植，都非常合适。花期长，每年从初夏至仲秋都是大花六道木的盛花期，开花时节满树白花，玉雕冰琢，晶莹剔透。在阳光照射下微微泛着荧光，衬以粉红的花萼、墨绿的叶片，分外醒目。即使白花凋谢，红色的花萼还可宿存至冬季，极为壮观。大花六道木不但很美，而且适应性非常强。它对土壤要求不高，酸性和中性土都可以；对肥力的要求也不严格，耐干旱、瘠薄，萌蘖力、萌芽力很强盛，同时可反复修剪。华东、西南及华北可露地栽培，是庭院绿化观赏的好树种。

尽管大花六道木的品种繁多，观赏效果极佳，但目前大花六道木在园林中并不常用。这可能与我国园艺品种引进晚，认识不够，很多苗圃没有生产有关系。

随着国外品种的逐渐引入，这种情况得到改善，大花六道木越来越多地被广泛运用。然而，由于大花六道木种子小，不易收获，很难进行种子繁殖，其生产常用扦插、分株或压条繁殖，但是，这些繁殖方法繁殖系数较低，育苗周期长，并且易传染病菌，品种退化快，尤其对于大花六道木中的花叶品种，引种很少，在市场上罕见，这些花叶品种扦插繁殖系数更加低，并且生根率低。

目前，对于大花六道木组织培养方法的报道寥寥无几，吕朝萍(金边大花六道木组织培养研究，南京林业大学硕士论文，2008)对金边大花六道木进行了组织培养，增殖三代后的增殖系数最大只有4.9，而且，其幼苗生根率较低，最大只有65％，整个繁育周期为165天，周期仍然较长。

发明内容

本发明的目的在于提供一种大花六道木的组织培养方法，将育苗周期缩短到90-120天，繁殖系数可提高至6.1，生根率为95-98％，且，获得的无菌苗能够保持母株的优良性状，可周年生产，能实现六道木良种苗木的规模化工厂生产。

为了达到上述目的，本发明的技术方案如下：

一种大花六道木的组织培养方法，包括以下步骤：

1)准备外植体

选取大花六道木的带腋芽茎段作为外植体，清洗后消毒，再冲洗干净，备用；

2)初代培养

将长度为0.5-1cm的带腋芽茎段，接入初代培养基中培养20-30天，长出腋芽；

培养条件：白天培养温度为25-26℃，夜间培养温度23-24℃，光照时间14-16小时，光照强度为2000-3000勒克斯；

所述初代培养基以WPM培养基为基本培养基，并添加了6-苄基腺嘌呤1.5-2mg/L和萘乙酸0.01-0.02mg/L；

3)增殖培养

将长1-2cm的枝条切下，接入增殖培养基中进行增殖培养，培养周期为50-60天，培养条件同步骤2)，得到增殖的茎段；

所述的增殖培养基以WPM培养基为基本培养基，并添加6-苄基腺嘌呤0.8-1.2mg/L和萘乙酸0.1-0.2mg/L；

4)生根培养

将2-3cm的茎段切下接入生根培养基中，培养20-30天后生根，得到生根苗，培养条件同步骤2)；

所述生根培养基以WPM培养基为基本培养基，并添加吲哚丁酸0.5-1mg/L和萘乙酸1-1.5mg/L；

5)炼苗、移栽

打开培养生根苗的培养瓶瓶盖，室温下炼苗2-3天，移栽至基质中，保持温度20-26℃，盖上塑料薄膜，保湿、遮荫培养2-3天，得到幼苗。

优选地，步骤1)中，所述外植体来自田间种植的大花六道木，在4-6月份取材，选取当年萌发出的带腋芽的茎段为外植体，茎段长度为5-7cm，在消毒时，在消毒液中加入吐温-20溶液。

优选地，步骤1)中，消毒过程为：用流水冲洗1-2小时后，用0.1％生汞消毒8-12分钟，或者先用70％的酒精消毒30-60秒，再用2％次氯酸钠消毒10-15分钟，冲洗，备用。