[发明专利]一种快速高效测定吐温80含量的比色方法及其应用

说明书

本发明公开了一种快速高效测定吐温80含量的比色方法。该方法系在水性介质中，使吐温80的聚乙氧基与硫氰酸钴铵盐在沸水浴加热条件下快速显色反应，定量生成不溶于水的蓝色显色产物，待冷却至室温后，定量加入有机溶剂萃取显色产物，比色法测定吐温80含量。本发明方法适用于各种药物制剂中药用辅料吐温80的快速定量测定，为相关产品中吐温80的定量控制提供了一种便捷、可靠的检测手段。

技术领域

本发明涉及一种快速高效测定吐温80含量的比色方法，及其在各种药物制剂中药用辅料吐温80定量控制中的应用，属于药品质量控制技术领域。

背景技术

吐温80(Tween80，CASNo.9005-65-6)，又名聚山梨酯80(Polysorbate 80)，系由油酸山梨坦与环氧乙烷聚合而成的聚氧乙烯20油酸山梨坦。其以失水山梨醇为骨架，侧链连接具有亲水特性的3个氧乙烯链、1个具有亲脂特性的脂肪链，平均相对分子质量1309.7。

吐温80是一种非离子型表面活性剂，具有良好的乳化和增溶作用，在药品、食品和化妆品等行业广泛用作乳化剂、分散剂、增溶剂或稳定剂，使用量1％～12％不等。由于具有较强的亲水性，能够与许多疏水性药物成分配伍，在药物制剂，特别是注射液中，常添加吐温80以增加药效成分溶解度，吐温80现已成为各国药典收载的一种常用药用辅料。在2009年CFDA公布的134种中药注射剂中，明确注明不含吐温80的仅有30种(王庆利,彭健.吐温80的安全性研究进展[J].毒理学杂志,2006,20(4):262-264；闫位娟,王建农,邵立军.42种中药注射剂中吐温80定性定量测定[J].第四军医大学学报,2009,30(21):2366-2369.)。

在化学性质上，吐温80很容易发生自氧化、环氧乙烷亚基的切除以及脂肪酸酯的水解等反应。环氧乙烷的自氧化导致过氧化氢的形成，侧链的切割最终形成甲酸等短链酸。已有研究表明：过氧化氢的形成会导致治疗性蛋白重组人睫状神经营养因子(rhCNTF)和重组人神经生长因子(rhNGF)的氧化；而脂肪酸酯键的水解，会使得吐温80释放出z位点的单油酸，从而引起急性超敏反应，并可能抑制体内氧化物产生，产生内在抗肿瘤效应。另一方面，其中多元醇化合物与环氧乙烷反应产生的聚乙烯类物质可能导致外周神经毒性。此外，由于其兼性分子特性，吐温80在体液中可能包裹p-糖蛋白等功能蛋白质分子形成胶束，从而使其参与生物膜界面的药物转运过程等生物活性受到抑制(王辉.蛋白制剂中Tween80含量检测研究[J].河北化工,2011,34(3):44-48.)。近年来，多西他赛注射液、鱼腥草注射液等含吐温80的注射剂不良反应事件频发，吐温80被证明为导致相关制剂不良反应的主要原因之一，对于相关制品中吐温80的限量控制已引起广泛关注和重视(DaherCF,BaroodyGM,Howland RJ.Effect ofa surfactant Tween 80on the formation and secretionofchylomicrons in the rat[J].FoodChemToxicol,2003,41(6):575-582；赵志英.注射用多西他赛致溶血反应的实验研究[J].临床合理用药,2010,3(10):26-27；刘婷,赵雍,曹春雨,等.鱼腥草注射液致类过敏反应的物质及其作用机制研究[J].中国中药杂志,2010,35(12):1603-1606.)。