[发明专利]蜕膜和绒毛配对cDNA芯片

说明书

本发明涉及一种蜕膜和绒毛配对cDNA芯片，所述的cDNA芯片通过如下方法制得：取孕早期流产妇女的蜕膜和绒毛组织，提取其RNA，逆转录成cDNA，预置在PCR反应板内，制作成cDNA芯片。本发明还提供该cDNA芯片的制备方法和应用。其优点表现在：每一位流产妇女分别取其蜕膜和绒毛组织cDNA形成配对，集中在同一芯片上，实现生理结构上的母‑胎界面在体外芯片上功能呈现。高通量，特异性强、敏感性高、操作简单快速、定量准确性高、结果可靠性强、结果分析简单并且样本带有完整的病例临床信息等优势，可用于定量检测目的基因在不同病人的表达情况及进行深入的临床信息相关性分析。

技术领域

本发明涉及生物芯片技术领域，具体地说，是一种蜕膜和绒毛配对cDNA芯片。

背景技术

生物芯片是指包被在硅片、尼龙膜等固相支持物上的高密度组织、细胞、蛋白质、核酸、糖类以及其他生物组分的高通量微阵列。利用高通量生物芯片，通过特异性分子杂交及染色技术，对受检样本进行检测，可准确、快速获取大量的分子检测信息。目前已广泛应用于生命科学研究、临床医学分子诊断、以及生物抗体靶向药物筛查和验证等领域。

正常妊娠是一个复杂的生理过程，胎儿虽携有遗传自父系的HLA抗原，但却并未引发母体产生针对胎儿这种特殊半同种“天然移植物”的排斥。妊娠期母-胎间存在着复杂的分子对话机制，以维持胎儿胎盘正常发育。妊娠早期胎儿绒毛外滋养细胞(EVT)侵入蜕膜组织，与母体蜕膜免疫细胞(DIC)及蜕膜基质细胞(DSC)直接接触，形成精细调控的母-胎界面。母-胎界面主要由3种细胞构成：胚胎来源的滋养细胞(trophoblast,Tro)，母体来源的蜕膜基质细胞(decidual stromal cell,DSC)和蜕膜免疫细胞(decicidual immune cell,DIC)。作为母-胎界面唯一携带有父系抗原的滋养细胞，其侵袭与迁移是胚泡着床、胎盘发育，并建立母-胎关系的关键步骤。蜕膜基质细胞除参与蜕膜营养供应之外，还分泌多种活性分子调节胚泡着床与胎盘发育，并作为免疫潜能细胞，参与抗原提呈和分泌细胞因子，发挥重要的免疫调节作用。蜕膜免疫细胞是母-胎免疫耐受的基础，通过表达特殊的活化标记和分泌大量的细胞因子，在母-胎界面局部发挥着不同于外周的免疫调节作用。正常生理妊娠时母-胎界面呈现Th2型免疫优势和调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)扩增现象，一旦这种耐受状态被打破，Th1型免疫反应占优势，将导致妊娠失败或妊娠并发症如复发性流产、子痫前期等。

对母-胎界面形成的深入研究是揭示正常妊娠维持机制和病理妊娠发病机制的重要途径和手段。

中国专利文献CN103614473A公开了一种桔小实蝇抗敌百虫和高效氯氰菊酯抗药性水平检测cDNA芯片及其制作方法和应用。中国专利文献CN101235420A公开了一种斑茅抗旱cDNA表达谱芯片及其应用。中国专利文献CN101245386A公开了一种用于多种肿瘤抑瘤基因检测的cDNA芯片。中国专利文献CN101942515A公开了一种检测茶树次生代谢相关基因表达信息的cDNA芯片。目前尚没有利用蜕膜和绒毛组织制备组织cDNA芯片的技术及应用的专利和文献报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种蜕膜和绒毛配对cDNA芯片。

本发明的再一的目的是，提供一种蜕膜和绒毛配对cDNA芯片的制备方法。

本发明的另一的目的是，提供一种蜕膜和绒毛配对cDNA芯片的应用。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：一种蜕膜和绒毛配对cDNA芯片，所述的cDNA芯片通过如下方法制得：取蜕膜和绒毛组织，提取其RNA，逆转录成cDNA，预置在PCR反应板内，制作成cDNA芯片。

进一步地，所述的PCR反应板为96孔或384孔。

进一步地，所述的蜕膜和绒毛组织为孕早期流产妇女的蜕膜和绒毛组织。