[发明专利]一种卵巢切除术导致的食蟹猴骨质疏松模型的构建方法

权利要求书

1.一种卵巢切除术导致的食蟹猴骨质疏松模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

A.术前给药及麻醉

首先选择各项检测指标在正常范围内的成年雌性食蟹猴进行实验，将12只食蟹猴随机分为2组，组间需要保证年龄、体重、腰椎骨矿物质含量和骨密度的均衡；第一组为双侧卵巢摘除手术组，第二组为假手术组，术前每只动物分别肌注一定剂量的抗生素，50mg/kg头孢曲松钠，0.05mg/kg阿托品，5-10min后，对每只动物进行手术麻醉；

B.双侧卵巢切除术

动物麻醉后使用碘伏消毒皮肤，上至肋下，下至耻骨联合上，两侧至侧腹壁，医用手术铺巾铺在腹部，由布巾钳固定；在下腹中线作大约4cm左右的纵行切口，钝性分离皮下组织暴露腹正中线，在腹白线切开腹膜，钝性游离出一侧卵巢，提起卵巢，显露卵巢输卵管系膜、卵巢固有韧带，保持骨盆漏斗韧带呈伸展状态，沿卵巢基底部钳夹骨盆漏斗韧带血管、系膜及卵巢固有韧带，完整切除卵巢，交叉贯穿缝合残端，同样的方式切除另一侧卵巢；检查有无活动出血，无出血，连续缝合创面，关闭腹腔，假手术组：手术方式同双侧卵巢切除术，不切除卵巢，以切除卵巢周围部分脂肪替代；

C.术后护理

所有动物术后连续3天给予0.02mg/kg的镇痛剂丁丙诺啡，每日三次，所有动物手术结束后，连续3天给予50mg/kg的抗生素头孢曲松钠，麻醉恢复期动物允许自由的活动及完全负重，动物实验人员在麻醉恢复期须密切监控所有动物；

D.安乐死及实验取材

实验期结束后，将所有动物麻醉安乐死之后，L2腰椎于10％中性福尔马林保存用于骨组织形态计量学测定；椎骨L4取材后裹着纱布浸泡于生理盐水，覆盖着塑料薄膜，放在塑料袋中，储存在-20℃用于生物力学检测；

E.建模结果验证

动物采血，进行血清骨形成标记物、血清骨吸收标记物和血清骨吸收标记物的分析，进行DXA检测，Hologic APEX软件分析面积骨密度相关参数，骨组织形态计量学测定，定量组织形态学测定，生物力学测定及压缩试验。

2.根据权利要求1所述的卵巢切除术导致的食蟹猴骨质疏松模型的构建方法，其特征在于，所述步骤A中的动物麻醉方法为，肌注0.05mL舒泰预麻醉，1.5-3.0％异氟烷。

3.根据权利要求1所述的卵巢切除术导致的食蟹猴骨质疏松模型的构建方法，其特征在于，所述步骤E中的压缩试验采用压缩法，将L4椎体中心部位分别置于MTS试验机上，加载速度为20mm/mim。

4.根据权利要求1所述的卵巢切除术导致的食蟹猴骨质疏松模型的构建方法，其特征在于，所述步骤E中的动物采血过程为，采4mL血到真空采血促凝管中并于室温放置1h，于4℃，2000-4000g，离心10min，收集血清。