[发明专利]一种臧酋猴血型的鉴定方法在审
申请号: | 201710557796.4 | 申请日: | 2017-07-10 |
公开(公告)号: | CN107202899A | 公开(公告)日: | 2017-09-26 |
发明(设计)人: | 杨锋;谢晓娟;曾代文 | 申请(专利权)人: | 四川省医学科学院·四川省人民医院实验动物研究所 |
主分类号: | G01N33/80 | 分类号: | G01N33/80 |
代理公司: | 成都正华专利代理事务所(普通合伙)51229 | 代理人: | 李林合,李蕊 |
地址: | 610212 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 臧酋猴 血型 鉴定 方法 | ||
1.一种臧酋猴血型的鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)采集臧酋猴后肢静脉血置于含多孔棉的容器中,以120-130r/min的转速震荡10-15min;
(2)吸取步骤(1)处理后的血液置于红头采血管中,室温静置40-60min,然后置于4℃过夜,再室温放置30-40min,于3500-6000r/min离心10-15min,吸取上清液;
(3)吸取新鲜的正常人O型血于离心管中,加入9-10倍体积,浓度为0.9%的生理盐水,轻微摇匀,于1500-2000r/min离心15-20min,弃去上清液,然后用0.9%的生理盐水清洗沉淀物3-4次;
(4)将步骤(2)所得上清液与步骤(3)所得物按体积比为1:1混合,并于37℃孵育30-40min,再于1300-1500r/min离心8-10min,取上清液;
(5)步骤(4)所得上清液与保护液按体积比为3-4:1-2混合;其中,保护液包括5%牛血清蛋白、5%蔗糖、5%PVP和含5%小牛血清的磷酸盐缓冲液,磷酸盐缓冲液浓度为5mM,pH值为7.4;
(6)将步骤(5)所得物分别与正常人的A型血红细胞和B型血红细胞按体积比为1:1混合,轻微摇匀后于1000r/min离心1min,观察凝集现象。
2.根据权利要求1所述的臧酋猴血型的鉴定方法,其特征在于,步骤(1)中离心转速为120r/min,离心时间为15min。
3.根据权利要求1所述的臧酋猴血型的鉴定方法,其特征在于,步骤(2)中室温静置60min,然后置于4℃过夜,再室温放置30min,于3800r/min离心10min。
4.根据权利要求1所述的臧酋猴血型的鉴定方法,其特征在于,步骤(3)中向正常人O型血红细胞中加入9倍体积,浓度为0.9%的生理盐水,轻微摇匀,于1500r/min离心15min。
5.根据权利要求1所述的臧酋猴血型的鉴定方法,其特征在于,步骤(4)中孵育时间为30min,离心速度为1372r/min,离心时间为10min。
6.根据权利要求1所述的臧酋猴血型的鉴定方法,其特征在于,步骤(4)所得上清液与保护液按体积比为3:1混合。
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