[发明专利]一种羊栖菜水溶性多糖的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及多糖提取技术领域，特别是涉及一种羊栖菜水溶性多糖的制备方法。

背景技术

羊栖菜多糖((sargassum fusiforme polysaccharides, SFPS)是从全藻中提取到的一种水溶性多糖，包括褐藻酸(alginic acid)、褐藻多糖硫酸（fucoidan, FCD)及褐藻淀粉(laminaran)。褐藻酸主要是以β-1，4键相结合的D-甘露糖醛酸聚合物，在羊栖菜中含量较高，占20.8%，褐藻多糖硫酸酷主要由L-岩藻糖和硫酸根组成，其含量较少，一般在0.5~10%之间。根据组成单糖的是否一致性，多糖可分为均多糖和杂多糖两种，近年来，许多研究表明羊栖菜中含有较多的水溶性褐藻硫酸化多糖，又有不同种 属的褐藻硫酸化多糖的生物活性相继被报道多个方面的生物活性，包括抗氧化、抗凝血、抗 炎、抗癌、抗肿瘤、免疫调节等生物学功能。

目前，褐藻多糖提取技术主要有酶解法、碱解法、酸解法、水提取法、超声波辅助， 但现有羊栖菜多糖的提取方法中，都存有不足，包括成本太高，操作复杂，耗能耗材较多，多 糖含量和纯度不高等。

现有技术，如中国发明授权专利文献，授权公告号：CN 101250232 B，该发明设计一种羊栖菜活性多糖提取工艺，采取四步提取法，即结合了超声波提取、水提、碱提、热水提、超声波技术，不仅提高了羊栖菜多糖提取率，而且防止多糖提取过程中对羊栖菜生物活性的破坏，除了赋予提取物多糖的特性外，该工艺所制备的羊栖菜活性多糖还具有高抗氧化性，特别适合应用于化妆品领域。另外，该工艺所生产的羊栖菜多糖采用活性炭吸附及AB-8 大孔吸附树脂进行脱色、去腥相结合方法，解决了羊栖菜等海洋褐藻类多糖去腥及脱色关键技术，有效提高多糖纯度、外观品质，并保证脱腥脱色后多糖的高抗氧化性，但是细胞破壁方面还不太理想，不利于多糖的提取率。

发明内容

本发明的目的在于提供一种羊栖菜水溶性多糖的制备方法，细胞破壁率高，多糖的得率高，对多糖活性的影响低，活性成分不易被破坏。

本发明为实现上述目的，所采取的技术方案为：一种羊栖菜水溶性多糖的制备方法，包括：多糖的超声浸取、去蛋白、醇沉干燥，具体操作步骤为：

（1）多糖的超声浸取的步骤为：将羊栖菜粗粉加入0.7-1%NaCl溶液、为粗粉重量的0.03~0.07%活性多肽， 活性多肽的氨基酸序列为：MKGLSFVLLVLLLMMPDGEGTDPEMQYWTCGYRGLCRFCAQYFVGHHGCPRRYRCCAIRA。混匀后超声波处理，超声波处理温度为3-5℃，时间为2-3h，置于3-5℃抽滤6-8h，抽滤液在3-5℃，以4500~8000rpm下离心20-25min，取上清液，得粗蛋白液，该活性肽具有亲水性和亲脂性，亲水性使其溶于蒸馏水中，亲脂性使其与螺旋藻细胞膜结合，使细胞膜下形成小孔，致使细胞内的物质泄漏，提高粗蛋白提取的工作效率，也提高活性蛋白的得率，该步骤利用活性肽和低盐溶液，结合溶胀法和超声波法进行细胞破碎，大大缩短了提取时间，提取效果好，粗蛋白液中蛋白含量高，避免了破碎处理过程中需避免因升温及机械力引起的蛋白质变性；

（2）去蛋白步骤为：将提取液调pH值到7.0，减压真空浓缩，用Sevage法去蛋白2-4次，上清液用5-10:1颗粒活性炭吸附后，离心，取上清液，过滤，收集滤液，采用Sevage法去蛋白，条件温和，不会引起多糖的变性，

（3）醇沉干燥过程为：向去除蛋白的液体内加入86%~92%的乙醇溶液，搅拌10-25min，过滤，将滤液真空干燥得多糖提取物，醇沉干燥过程中真空干燥的条件为：真空度为3000-5000Pa，温度为60-70℃，时间为25-35min，多糖溶于热水而不溶于高浓度的乙醇，在加入乙醇溶液后，羊栖菜多糖以沉淀的形式从水相中析出，所得的羊栖菜多糖纯度高，品质好，提高了产品的经济价值。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：1）本发明首先对羊栖菜进行超声浸取，利用活性肽和低盐溶液，结合溶胀法和超声波法进行细胞破碎，大大缩短了提取时间，提取效果好，粗蛋白液中蛋白含量高，有利于提高多糖的得率和活性；2）符合绿色环保的要求，且提取方法合理，操作简单，不需要特殊的仪器设备，降低了生产成本，为工业化应用提供了有利条件；3）本提取方法获得的羊栖菜水溶性多糖具有优异的抗氧化、抗凝血、抗 炎、抗癌、抗肿瘤、免疫调节等生物学功能。

具体实施方式

以下结合实施例作进一步详细描述：

实施例1：