[发明专利]一株提高竹红菌素发酵产率的伴生细菌菌株及其应用

说明书

本发明公开了一株提高竹红菌素发酵产率的伴生细菌菌株及其应用，菌株的分类名称为：黄褐假单胞菌（Pseudomonas fulva），其保藏编号为CGMCC No.13931。将所述不同浓度伴生细菌活菌（10³～10⁵/mL）加入到培养了5～7 d的竹黄菌发酵液中，继续培养获得竹红菌素。本发明能有效提高竹红菌素的产量，且对人畜无毒害作用，对环境无污染。

技术领域

本发明涉及一种生物菌株，具体涉及一株天然药用真菌子实体伴生细菌-黄褐假单胞菌，本发明还涉及该菌株在提高竹红菌素产量中的应用。

背景技术

竹黄菌（Shiraia bambusicola P. Heen）又名天竹花、竹三七等，属于子囊菌亚门（Ascomycotina）、肉座菌科（Hypocreaceae）、竹黄属（Sharaia）。竹黄菌主要寄生于短穗竹属（Brachystachyum Keng.）竹子的细嫩枝干上，形成粉红色、龟裂瘤状的子实体，称作竹黄，其主要分布在中国南部的浙江、云南等地，作为我国传统珍稀药用真菌，具有止咳祛痰、祛风利湿等功效，常被用于治疗虚寒胃痛、坐骨神经痛、气管炎等疾症。现代药理学研究表明竹红菌素（hypocrellins, Has）是竹黄菌的主要活性成分，包括竹红菌甲素（hypocrellin A, HA）、乙素（hypocrellin B, HB）、丙素（hypocrellin C, HC）及丁素（hypocrellin D, HD），其中竹红菌甲素HA是最主要的成分。目前竹红菌素在临床上用于治疗外阴白斑、皮肤白色病变以及瘢痕疙瘩等皮肤病。同时，竹红菌素作为非卟啉类的新型光敏剂，有更广的吸收光谱、更好的光诱导单线态氧（Molecular single oxygen, ¹O₂）产生能力、较低的光暗毒性等优点，使其在各种皮肤病、肿瘤、病毒等的光化学疗法（photodynamictherapy，PDT）上的应用潜能受到人们广泛的关注，具有广泛的应用价值。

由于竹黄野生资源有限，竹红菌素产量低成为了其医疗及工业中应用最大的障碍，因此竹黄菌液态深层发酵成了生产竹红菌素的首选方法。但目前通过人工发酵方法所产竹红菌素产量较低，为了提高竹红菌素产量，常用的方法包括人工培育子实体、化学合成、选育高产菌株、优化培养条件、添加诱导子等。而通过外源诱导提高竹红菌素产量的研究较少。如：Du等人从竹子中分离得到的内生真菌的甲醇/氯仿提取物能够刺激提高竹红菌素产量，但粗提物有效成分未见报道，所以并不能确定发挥刺激作用的有效成分（Du W,Liang Z, Zou X, et al. Effects of microbial elicitor on production ofhypocrellin by Shiraia bambusicola. Folia microbiologica, 2013, 1-7.）。另有在竹黄菌中转入竹红菌素合成过程中关键基因来提高其含量，如Deng等人将竹红菌素合成关键酶基因多铜氧化酶 (MCO) 在竹黄菌中过表达，该方法对于提高竹红菌素产量效果显著（Deng H, Gao R, Chen J, et al. An efficient polyethylene glycol-mediatedtransformation system of lentiviral vector in Shiraia bambusicola. ProcessBiochemistry, 2016, 1357-1362.），但由于基因工程目前处于尝试阶段，尚无大规模生产的应用。

因此，寻求新的外源诱导培养方法，以提高竹红菌素产量，对于竹红菌素的推广应用有着重要的意义。

发明内容

本发明的发明目的是提供一株提高竹红菌素发酵产率的伴生细菌菌株，并提供利用该菌株提高竹红菌素产量的方法。