[发明专利]一种MDA‑MB‑231乳腺癌细胞专用冻存液

说明书

技术领域

本发明属于生物技术应用领域，具体地，涉及一种MDA-MB-231乳腺癌细胞专用冻存液。

背景技术

乳腺癌是女性最常见的癌症，主要包括导管癌和小叶癌。2016年美国CA（A Cancer Journal for Clinicians）公布的最新统计数据显示，美国2016年预计将有420840例女性患乳腺癌，占女性新发恶性肿瘤的38%，居女性恶性肿瘤发病率第一位，并且死亡人数将达52930例。更为严重的是全球的乳腺癌发病率正在逐年增长。

细胞培养是生物与健康相关研究领域的一项重要技术。随着生命科学的迅速发展，目前细胞培养已成为细胞生物学、分子生物学、遗传学和免疫学等学科研究的重要基础。为了深入探讨细胞的生长活动规律、有关疾病的病理和药物的药理（毒理）机制，开发具有不同针对性的细胞培养方法具有重要意义。

其中，MDA-MB-231乳腺癌细胞作为人源性高转移乳腺癌细胞，常用于乳腺癌的体内外研究。然而，随着研究过程中越来越多的运用组织细胞培养增殖技术，将MDA-MB-231乳腺癌细胞采用低温度进行长期保存数年、数十年甚至数百年，一旦需要，可随时对所保存的细胞进行复苏，恢复其完整的形态结构与生物学特性，供生命科学研究实验。

发明内容

发明目的：本发明提供了一种MDA-MB-231乳腺癌细胞专用冻存液。

技术方案：本发明提供了一种MDA-MB-231乳腺癌细胞专用冻存液， 以重量组分计，包括以下组分：二甲基亚砜5-15份、羟甲基淀粉2-5份、海藻糖3-12份、维生素E0.5-3份、25%山梨醇1-5份、丙二醇0.8-1.6份、(S)-(-)-1-(4-氟异喹啉-5-基)磺酰基-2-甲基-1,4-二氮环庚烷0.5-2份和基础培养基80-90份。本发明所述的MDA-MB-231乳腺癌细胞专用冻存液，组分合理，营养丰富，其中，25%山梨醇为渗透性保护液，而(S)-(-)-1-(4-氟异喹啉-5-基)磺酰基-2-甲基-1,4-二氮环庚烷则抑制细胞活动和基因表达，维生素E的抗氧化性好，在保证休眠细胞的营养的同时还可以显著减少对细胞的损伤，提高冻存细胞的存活率，并且在增殖方面也保持很好的状态。

进一步的，上述的MDA-MB-231乳腺癌细胞专用冻存液，所述基础培养基以重量组分计，包括以下组分：葡萄糖 82-88份、碳酸氢钠 12-25份、丙酮酸钠10-16份、脂肪酸白蛋白6-12份、氯化钾35-45份、无水硫酸镁 6-10份、氯化钠70-78份、无水磷酸二氢钠10-14份、叶酸 0.3-0.5份、肌醇0.8-1.2份、烟酰胺0.3-0.6份、无水氯化钙25-35份、硝酸铁0.2-0.4份、丁二酸6-8份、丁二酸钠12-16份、D-泛酸钙 0.3-0.6份、N-异丙基甲基丙烯酰胺0.4-0.6份、酒石酸胆碱0.6-0.8份、核黄素0.1-0.3份、盐酸硫胺0.2-0.4份、盐酸吡哆辛 0.3-0.5份、L-丙酰胺-L-谷氨二肽0.4-0.8份、乙酸酯1.5-2份、生物素0.6-0.8份、硫辛酸0.4-0.7份、酚红钠1-1.3份和去离子水100份。

进一步的，上述的MDA-MB-231乳腺癌细胞专用冻存液，所述基础培养基还包括3-8份氨基酸，所述氨基酸以重量组分计，由以下组分组成：L-盐酸精氨酸 5-10份、L-盐酸胱氨酸 3-8份、L-丝氨酸3-6份、甘氨酸1-5份、L-盐酸组氨酸 4-6份、L-异亮氨酸8-20份、L-亮氨酸7-18份、L-盐酸赖氨酸10-20份、L-甲硫氨酸1-6份、L-苯丙氨酸2-8份、L-苏氨酸5-15份、L-色氨酸1-3份、L-酪氨酸5-9份和L-缬氨酸8-12份。

进一步的，上述的MDA-MB-231乳腺癌细胞专用冻存液，所述基础培养基还包括2-5份辅助因子，所述辅助因子以重量组分计，由以下组分组成：胰岛素生长因子3-8份、白介素6 2-5份、白介素10 1-4份、白介素12 3-6份、TNF-β2-10份、GM-CSF1-5份。基础培养基组分合理，营养丰富，可以提高MDA-MB-231乳腺癌细胞冻存时的营养物质，保证冻存细胞的活性。

进一步的，上述的MDA-MB-231乳腺癌细胞专用冻存液，所述基础培养基还包括体积比10-30%的胎牛血清。可以根据需要，进一步增加胎牛血清，提高冻存细胞的存活率，保持细胞活性。

进一步的，上述的MDA-MB-231乳腺癌细胞专用冻存液，所述基础培养基以重量组分计，还包括0.006份青霉素和0.01份的链霉素。可以有效防止冻存细胞被污染。