[发明专利]一种可同时检测汞和银离子的核酸适配体、试剂盒及方法

说明书

本发明涉及化学检测技术领域，具体而言，本发明设计了一段核酸适配体序列，能够同时结合汞和银离子，并借助双链DNA特异性染料，开发了一种能够同时检测汞和银离子的检测方法。本发明提供的核酸适配体在用于Hg²⁺和Ag⁺同时检测时反应快速、灵敏度高、选择性好。通过优化反应体系及反应条件，本申请在检测Hg²⁺和Ag⁺时具有更高的灵敏度及更宽的线性范围。

技术领域

本发明涉及化学检测技术领域，具体而言，涉及一种可同时检测汞和银离子的核酸适配体、试剂盒及方法。

背景技术

汞离子(Hg²⁺)和银离子(Ag⁺)是高毒性金属离子和广泛的环境污染物中的两种，即使在低浓度下也会对环境和人造成严重的永久性的损害。更严重的是，通过污染水源，Ag⁺和Hg²⁺可以积累到农产品和水产品中，进入人类的食物链。Hg²⁺污染对人类有着极大的危害，人体无法通过自身的代谢排泄食物链或其他途径积累在体内的微量汞，而微量汞在体内的积累将直接导致心脏、肝、甲状腺等疾病，甚至导致神经系统紊乱、慢性中毒及智力障碍。纳米银有着特殊的杀菌、催化和光学特性，在电子、电镀、感光等行业有着广泛的应用，这些涉及银的行业的生产和应用中会产生含银的工业废水，这种含银废水对环境的污染非常严重。在现有Ag⁺的环境中长时间暴露的情况下，人可能引起缓慢进行的物理和神经退行性疾病。因此，Hg²⁺和Ag⁺的检测在环境监测，食品安全和临床诊断领域非常重要。

汞能够和胸腺嘧啶T形成T-Hg-T结构，银离子能够和胞嘧啶C形成C-Ag-C的结构，利用这一原理已经建立了一些基于DNA的用于检测水，药物，食品和临床样品中的Hg²⁺或Ag⁺检测到方法。但是这些检测都是单种金属离子检测。然而，Hg²⁺和Ag⁺通常共存于水，土壤甚至生物系统中，对于Hg²⁺和Ag⁺的共存系统，这些测定需要不同的检测方法和实验条件以同时检测Hg²⁺和Ag⁺，这增加了这些测定的复杂性和不便。为了满足实际样品分析的实际需要，也有人建立能够同时检测Hg²⁺和Ag⁺的方法，然而这些方法在实际应用中遭受某些限制，例如使用掩蔽剂，低灵敏度和复杂性。因此，在实际样品中实现Hg²⁺和Ag⁺的简单和同时检测仍然是一个巨大的挑战。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种可同时检测汞和银离子的核酸适配体、包含该核酸适配体的试剂盒及同时检测汞和银离子的方法，以实现Hg²⁺和Ag⁺的简单和同时检测。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

本发明一方面涉及一种可同时检测汞和银离子的核酸适配体，所述核酸适配体的序列如SEQ ID NO:1所示。

如上所述的核酸适配体的互补链如SEQ ID NO:2所示。

一种检测汞和/或银离子的试剂盒，所述试剂盒包括如上所述的核酸适配体和如上所述的互补链，以及双链DNA结合荧光染料。

优选的，如上所述的试剂盒，所述双链DNA结合荧光染料包括SYBR Green I、SYBRgold、EvaGreen、PicoGreen、Peko Green、EB、Genefinder、Calcein中的任一种。

一种检测汞和/或银离子的方法，包括：

1).将核酸适配体与待检离子混合孵育；