[发明专利]来源于肺转移灶的高转移人卵巢癌细胞系及其建立和应用

说明书

本发明公开了来源于肺转移灶的高转移人卵巢癌细胞系及其建立和应用，其命名人高转移卵巢癌细胞系A2780‑M，于2017年01月22日保藏在于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C201719。本发明的人高转移卵巢癌细胞系A2780‑M来源于人卵巢癌A2780细胞系，且具有较母系更明显的增殖活性、更强的转移功能、侵袭功能和细胞运动能力，可以作为可靠的高转移人卵巢癌细胞系和动物模型，用于研究卵巢癌转移的分子机制，还能为临床诊治、药物筛选及预后判断提供新的靶点。

技术领域

本发明属于微生物动物细胞领域，具体涉及人卵巢癌细胞系及其建立和应用。

背景技术

卵巢癌死亡率居妇科肿瘤首位，转移扩散是其预后不良的首要原因。最新统计表明国内外卵巢癌的5年生存率在40％左右，全球每年有超过200,000新增病例。卵巢癌患者在临床被确诊时，往往已处于中晚期，约30％首诊时即有转移发生，还有30～40％的患者在随后几年中将发生转移。卵巢癌一旦发生转移，一般临床常规治疗效果不佳，死亡率极高，严重威胁患者的健康，是人类面临的亟待阐明和解决的重大基础和临床问题。因此，建立可靠的高转移人卵巢癌细胞系和动物模型成为卵巢癌研究的当务之急。它不仅有利于阐明卵巢癌转移的分子机制，还能为临床诊治、药物筛选及预后判断提供新的靶点，具有特殊的重要性和迫切性。

现有研究中，可用于小鼠移植瘤模型转移研究的细胞系包括SKOV-3、CAOV-3、CAOV-4、OVCAR-3、AO、3AO及HO-8910等。其中AO、CAOV-3、CAOV-4和OVCAR-3有相对较高的转移率，研究显示主要是出现在肺转移(60％-90％)(参见：高庆蕾，孟力，王世宣，et al.卵巢癌高频转移细胞模型的建立及其与nm23-H1的相关性研究.现代妇产科进展.2003；12:161-163.)。但是，目前通过肺转移灶建立的卵巢癌高转移细胞株十分有限，高转移人卵巢癌裸鼠模型(NSMO)和高转移人卵巢癌细胞系(HO-8910PM)是目前少有的自发性肺转移人卵巢癌组织模型和细胞模型，其建立时间比较早，为卵巢癌生物学的研究提供了最基本的实验材料。但研究肿瘤的生物学行为，无论是在细胞水平还是在分子生物学水平，都需要有一个良好的参比对照系统，这样可以简化实验程序，最大限度的减少实验结果中的混杂因素，有利于分析总结。尤其是，近年来新的基因标志物不断涌现，这些新的标志物在卵巢癌预后方面有了进一步的研究。因此，建立新的肺转移灶来源的高转移细胞系，以丰富和完备人卵巢癌细胞系库，为研究卵巢癌转移机制提供合适的体外模型，以促进人卵巢癌的基础和临床研究，是非常有必要的。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供一种人高转移卵巢癌细胞系A2780-M及其建立和应用。该细胞系能够稳定传代、成瘤性好，且在体外能长期培养传代，并可成功建立移植瘤模型。此外，由于该细胞系是自发转移至肺所建立的新细胞，因此对于研究卵巢癌转移特别是血道转移及其机制是一个良好的模型。

为了实现上述目的，本发明采用了以下技术方案：

一种人卵巢癌细胞系，命名为人高转移卵巢癌细胞系A2780-M，于2017年01月22日保藏在于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：C201719。

本发明还提供如上所述的人卵巢癌细胞系的子代细胞系。

一种人卵巢癌细胞系的建立方法，包括以下步骤：

采用人卵巢癌细胞A2780为亲本细胞，通过体外Transwell小室筛选出高运动转移性能的细胞，再在裸鼠皮下接种促成肺转移灶形成；分离所述肺转移灶，体外贴壁培养，经连续扩增、传代得到一株稳定生长的人高转移卵巢癌细胞A2780-M。

本发明还提供如上所述的人卵巢癌细胞系或所述子代细胞系在作为卵巢癌发生、卵巢癌发展或卵巢癌转移的细胞模型中的应用。