[发明专利]一种氮掺杂碳量子点荧光增敏检测环丙沙星的方法

说明书

本发明公开了一种氮掺杂碳量子点荧光增敏检测环丙沙星的方法；本发明采用豆奶为碳源及氮源，一步水热法合成高荧光量子产率的氮掺杂荧光碳量子点；氮掺杂荧光碳量子点能增强环丙沙星的荧光，其增强的荧光信号强度与环丙沙星浓度呈一定线性关系，据此建立了检测环丙沙星的荧光分光光度法；本发明制备的氮掺杂荧光碳量子点对环丙沙星有显著的荧光增敏作用，且选择性强，用于环丙沙星的荧光测定，具有灵敏度高、特异性的特点。

技术领域

本发明涉及化学分析检测技术领域，更具体的是一种氮掺杂碳量子点荧光增敏检测环丙沙星的方法。

背景技术

环丙沙星又称环丙氟哌酸，属于化学合成的氟喹诺酮类抗菌药。该药抗菌谱广，杀菌作用力强，毒性低，对革兰氏阴性菌、支原体具有强大而稳定的杀灭作用，对革兰氏阳性菌、衣原体等致病菌也有良好的抗菌作用，适用于治疗畜禽慢性呼吸道疾病、支原体病、大肠杆菌病、沙门氏菌病、巴氏杆菌病等。环丙沙星以口服和注射均吸收迅速，体内分布广，生物利用度高、毒性较低，且无交叉耐药性等优点而备受欢迎。其含量常用的测定方法有紫外分光光度法，高效液相色谱法，流动注射化学发光法，荧光光度法。其中荧光光度法目前报道的测定方法主要集中在：(1)利用环丙沙星本身的自然荧光进行测定，但灵敏度较低；后来有人报道表面活性剂对环丙沙星的自然荧光有较强的增敏作用，建立了胶束增敏荧光光谱法测定环丙沙星；(2)利用环丙沙星能与某些稀土离子或金属离子形成配合物进行测定。

碳量子点是一类粒径一般小于10nm的新型碳材料。它具有优异的光学性能，可调的激发和发射行为，较高的荧光稳定性，较低的毒性和良好的生物相容性，在越来越多的领域中得到了广泛的应用，逐渐成为纳米碳材料中的一颗新星。目前，人们致力于探索制备高量子产率碳点的方法。碳量子点经过掺杂或者表面钝化后,其荧光量子产率以及光电性能均可以得到明显的提高。最近几年,有很多关于氮元素掺杂碳量子点的文献报道,碳量子点的荧光量子产率均得到了提高；本发明提供的高灵敏、高选择性技术方案目前尚未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高灵敏、高选择性的氮掺杂碳量子点荧光增敏检测环丙沙星的方法。

本发明氮掺杂碳量子点荧光增敏检测环丙沙星的方法包括如下步骤：

（1）标准工作曲线的绘制：在0.05～20 µmol/L的线性范围内，采用醋酸-醋酸钠缓冲液配置8个不同浓度梯度的环丙沙星标准溶液，并定容至5 mL，然后加入一定量的水溶性氮掺杂荧光碳量子点溶液，涡旋混匀静置后，于荧光分光光度计上，激发波长为350nm，发射波长为425nm测定荧光强度，以荧光增强强度对其相应浓度作图进行回归分析，即可得到标准工作曲线，由此可得到环丙沙星的线性回归方程与其相关系数；

（2）样品制备

蜂蜜样品：称取蜂蜜2.00-5.00g置于离心管中，加入水、pH =4磷酸盐缓冲液总量5-10mL，涡旋1-3min，加入质量浓度5%的乙酸乙腈溶液至50mL涡旋5-10min后加入无水硫酸镁5g涡旋1-3min，5000 r /min离心5-10 min，吸取上清液备用，其中水与pH =4磷酸盐缓冲液的体积比为2-4:1；

肉制品样品：称取2.00-5.00g样品置于离心管中，加入pH=7的0.1 M磷酸缓冲液5-10mL，匀浆1 -3min，5000 r /min 离心5-10 min，分取上清液于另一试管中，再用pH = 7的0.1 M磷酸缓冲液10-15 mL洗匀浆机刀头及离心管内残渣，匀浆1-3min，一并转入离心管中，5000 r /min 离心5-10min，合并两次上清液，混匀、备用；

奶制品样品：取5-10 mL奶样，加入10-15mL甲醇-水-甲酸提取液、l-3 mL 质量浓度4％的三氯乙酸乙腈溶液，涡旋1-3 min，超声5-10 min，10000r/min下离心5-10 min，取上清液备用；其中甲醇-水-甲酸提取液是按体积比28:72:0.1的比例将甲醇、水、甲酸混匀制得；