[发明专利]一种基于纳米金标记的重金属镉可视化检测方法

权利要求书

1.一种基于纳米金标记的重金属镉可视化检测方法，其特征在于：用柠檬酸钠还原法制得纳米金颗粒，颗粒粒径15nm左右；随后取巯基化镉离子适配体和巯基化镉离子适配体互补寡核苷酸单链分别与1mmol/L TCEP混合静置30～40分钟，再与纳米金混合在35～40℃下摇床孵育10～15小时，其中所述的巯基化镉离子适配体DNA1序列为5’SH-ACC GAC CGTGCT GGA CTC TGG ACT GTT GTG GTA TTA TTT TTG GTT GTG CAG TAT GAG CGA GCG TTGCG-3’，巯基化镉离子适配体互补寡核苷酸单链DNA2序列为5’SH-CGC AAC GCT CGC TCATAC TGC ACA ACC AAA-3’；然后再将混合液在35～40℃下陈化10～15小时，并在这个过程中分多次加入NaCl，使NaCl的终浓度达到0.1mol/L；随后将这两种探针与待测物按一定比例混匀，所述的镉离子适配体探针、镉离子适配体互补寡核苷酸单链探针、待测溶液的体积比为1:2:1，然后将混合溶液混匀，95℃下加热10min，然后放置于37℃环境中孵育50min，加入NaCl溶液至终浓度为0.1mol/L，反应5分钟；靶标的加入会破坏DNA对金纳米颗粒的保护作用，随着靶标浓度的增大，纳米金颗粒在高盐环境下会发生聚集，溶液的颜色由红色变为紫色或蓝紫色，导致吸收峰变宽并红移至620nm左右；观察颜色变化并在400～800nm进行UV-vis扫描，根据A620/A520的比值和镉离子浓度的对数值绘制出镉离子浓度的标准曲线；随后，实际检测过程中通过测得最终检测液的A620/A520的比值，根据标曲即可换算得到镉离子浓度值。

2.如权利要求1所述的可视化检测方法，其特征在于：制备纳米金时，所采用的试剂为0.2～0.3％(w/v)氯金酸溶液与0.8～1.2％(w/v)的柠檬酸三钠溶液，其中所述的柠檬酸三钠溶液含有0.02～0.05％柠檬酸；制得纳米金后，离心浓缩3～4倍待用。