[发明专利]一种皮质醇的核酸适配体及检测皮质醇的金标试纸条

说明书

技术领域

本发明属于激素检测技术领域，具体涉及一种皮质醇的核酸适配体及检测皮质醇的金标试纸条。

背景技术

皮质醇是一种可以由人体自然产生的叫做皮质类固醇激素的荷尔蒙。还有人将其称为压力激素，因为人类在面临显著压力时就会产生更多这种荷尔蒙。对抗反应时最明显。肾上腺负责分泌皮质醇，并且一天中产生的数量也有不同，人体在上午有更多可以利用皮质醇的倾向。皮质醇的水平在每天清晨起床后30分钟内急剧升高，并在起床后30～45分钟左右达到最高值，随后在一天内逐渐下降,直到睡觉前达到最低值。

人体内的皮质醇的在正常含量下可以确保需要的钠不流失，并有促进提高短期记忆力的作用。此外，皮质醇的另一个功能是帮助肝脏清除毒素。压力状态下身体需要皮质醇来维持正常生理机能；如果没有皮质醇。身体将无法对压力作出有效反应，皮质醇在操纵情绪和健康、免疫细胞和炎症、血管和血压间联系，以及维护缔结组织(例如骨骼、肌肉和皮肤)等方面具有特别重要的功效。压力状态下，皮质醇一般会维持血压稳定和控制过度发炎。人们都有压力，其中那些承受重复压力的人，或者生活节奏紧张的人，或者正在节食的人，或者每晚睡眠少于8小时的人，都很有可能长期处在压力状况下，从而使他们的皮质醇水平长期偏高。这时皮质醇的负面效应开始显现为新陈代谢的变动：血糖升高、食欲增加、体重上升、性欲减退以及极度疲劳等等。皮质醇增多症可以导致库欣氏综合征，其结果是体重迅速增加、多汗、容易瘀伤、心理障碍。低皮质醇症容易引起艾迪生病，造成体重下降，肌肉疼痛，情绪不稳定和疲劳等问题。皮质醇增多可引起糖、蛋白质、脂肪、电解质代谢紊乱和多种脏器功能障碍。广泛性焦虑障碍(Generalized anxiety disorder，GAD)是最常见的一种焦虑障碍，其在成人中的终身患病率估计为4.1％～6.6％，女性患者是男性的2倍。它不仅严重影响患者的生活质量、心理健康、社会功能，同时还会和其他疾病共病，增加自杀风险，已成为一个不容忽视的问题。这种焦虑的症状与人体内的皮质醇含量有很大的关系。在精神生物学研究中，皮质醇(啮齿类动物是皮质酮)是一种非常重要的激素，它被称为“压力荷尔蒙”，人体面临生理、心理刺激时，其分泌量增高(应激反应)。减少压力并学会放松技巧有助于避免皮质类固醇激素过量分泌，经常锻炼也可以帮助减少这种荷尔蒙。

目前，皮质醇测定多采用放射免疫法、酶联免疫法、LC-MS法。免疫法灵敏度较高，能够检测出头发中的痕量皮质醇，但存在交叉反应、测定结果偏高。各种商业性的免疫试剂盒测定的结果差异性较高，试剂盒的成本也较昂贵。LC-MS法虽然准确灵敏，但需要昂贵的仪器，故一般实验室难以普及。传统的各种检测方法，过程复杂，耗时长，成本高，并且不能保证批间的稳定性。因此及时有效的检测人体中的皮质醇，对于我们了解当时自己的身体状况有很重要的意义，有助于我们采取下一步行动以改善自己的生活状态。

发明内容

本发明的目的在于解决现有技术中存在的问题，提供一种皮质醇的核酸适配体、该核酸适配体的互补探针，以及由所述核酸适配体、探针组成的检测皮质醇的金标试纸条和其制备方法。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种皮质醇的核酸适配体，其核苷酸序列如下所示：

5’-GCAGAGGATCATGATGCGGGGTGGAGAATGGGCCGCACTTCGGCTTCACTCTTG GCAGAAAAGCTT-3’(SEQ ID NO.1)。

优选的，所述的核酸适配体的5’端经过巯基修饰。

与上述核酸适配体互补配对的互补探针A，其核苷酸序列如下所示：

5’-AAGCTTTTCTGCCAAGAGTGAAGCCGAAGT-3’(SEQ ID NO.2)。

优选的，所述的互补探针A的5’端经过生物素修饰。

一种检测皮质醇的金标试纸条，包含样品玻璃纤维膜、核酸探针金标垫、硝酸纤维膜、吸水玻璃纤维膜和塑料衬板。所述的核酸探针金标垫上附着胶体金标记的皮质醇的核酸适配体。所述的硝酸纤维膜上划有检测线和参照线，检测线由皮质醇-牛血清蛋白偶联物溶液划成，参照线由结合了链霉亲和素的生物素修饰的互补探针A溶液划成。样品玻璃纤维膜、核酸探针金标垫、硝酸纤维膜、吸水玻璃纤维膜依次搭接粘贴在塑料衬板上，硝酸纤维膜的参照线靠近吸水玻璃纤维膜一端。