[发明专利]IL‑6定量检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种IL-6定量检测试剂盒，其特征在于，包括：偶联有IL-6抗体的磁微球试剂，反应稀释液试剂和IL-6校准品。

2.根据权利要求1所述的IL-6定量检测试剂盒，其特征在于，所述偶联有IL-6抗体的磁微球试剂包含：偶联有IL-6抗体的磁微球和基质溶液，其中，所述基质溶液包括：稳定剂0.5～20g/L，促凝剂2～200g/L，表面活性剂0.1～10mL/L，防腐剂0.5～5mL/L和10～50mmol/L的磷酸盐缓冲液，所述基质溶液pH值为7.0～9.0。

3.根据权利要求2所述的IL-6定量检测试剂盒，其特征在于，所述偶联有IL-6抗体的磁微球所用的磁微球为顺磁性微球，粒径为100～200nm，所述偶联有IL-6抗体的磁微球在所述基质溶液中的质量浓度为1～4mg/mL。

4.根据权利要求2所述的IL-6定量检测试剂盒，其特征在于，所述稳定剂为牛血清白蛋白和/或酪蛋白；所述促凝剂为蔗糖和/或聚蔗糖-400；所述表面活性剂为吐温-20和/或曲拉通X-100；防腐剂为Proclin300。

5.根据权利要求2所述的IL-6定量检测试剂盒，其特征在于，所述偶联有IL-6抗体的磁微球试剂包含：所述稳定剂为5g/L的牛血清白蛋白和5g/L的酪蛋白，所述促凝剂为100g/L的蔗糖和50g/L的聚蔗糖-400，所述表面活性剂为1mL/L的吐温-20和1mL/L的曲拉通X-100，所述防腐剂为1mL/L的Proclin300，25mmol/L磷酸盐缓冲液，所述基质溶液pH值为7.4，所述偶联有IL-6抗体的磁微球在所述基质溶液中的质量浓度为2mg/mL。

6.根据权利要求2所述的IL-6定量检测试剂盒，其特征在于，所述偶联有IL-6抗体的磁微球中IL-6抗体与磁微球是采用EDC-NHS法偶联的。

7.根据权利要求1所述的IL-6定量检测试剂盒，其特征在于，所述反应稀释液试剂包含：稳定剂0.5～20g/L，促凝剂2～50mL/L，表面活性剂0.1～3mL/L，防腐剂0.5～5mL/L和磷酸盐缓冲液10～50mmol/L，所述反应稀释液试剂的pH值为7.0～9.0。

8.根据权利要求7所述的IL-6定量检测试剂盒，其特征在于，所述稳定剂为牛血清白蛋白，所述促凝剂为聚乙二醇8000，所述表面活性剂为吐温-20，防腐剂为Proclin300。

9.根据权利要求8所述的IL-6定量检测试剂盒，其特征在于，所述反应稀释液试剂包含：稳定剂为5g/L的牛血清白蛋白，促凝剂为20mL/L聚乙二醇8000，表面活性剂为1mL/L的吐温-20，防腐剂为1mL/L的Proclin300，缓冲溶液为25mmol/L的磷酸盐缓冲液，所述反应稀释液试剂的pH值为7.4。

10.根据权利要求1所述的IL-6定量检测试剂盒，其特征在于，所述IL-6校准品包含：pH7.4的50mmol/L的磷酸盐缓冲液、重组人源IL-6、10g/L的牛血清白蛋白和1mL/L的防腐剂。

11.根据权利要求10所述的IL-6定量检测试剂盒，其特征在于，所述IL-6校准品的浓度范围为0～1000pg/mL。

12.一种如权利要求1至11中任一项所述的IL-6定量检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括配制偶联有IL-6抗体的磁微球试剂，配制反应稀释液试剂和配制IL-6校准品的步骤；

其中，配制所述偶联有IL-6抗体的磁微球试剂包括：制备偶联有IL-6抗体的磁微球的基质溶液、制备IL-6抗体与磁微球偶联物以及将所述偶联有IL-6抗体的磁微球的基质溶液与所述IL-6抗体与磁微球偶联物混合制得所述配制偶联有IL-6抗体的磁微球试剂；

配制所述反应稀释液试剂包括：取pH7.4磷酸盐缓冲液加入稳定剂、促凝剂、表面活性、防腐剂充分混匀并溶解后用0.22μm微孔滤膜过滤，最终用相应的缓冲液定容，密封保存备用；

配制所述IL-6校准品包括：配制校准品稀释液以及不同浓度梯度的校准品。