[发明专利]基于球藻提取物的复配物及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及复配物制备技术领域，具体是一种基于球藻提取物的复配物及其制备方法。

背景技术

多糖是一类广泛存在于动物细胞膜、植物和微生物细胞壁中的生物大分子，是构成生命的四大基本物质之一。近几十年来研究发现多糖具有复杂的生物和生理活性，特别是近十几年来随着世界各国科学家对植物多糖分离纯化、结构分析、免疫学及药理学等方面研究的不断深入，寻找一种资源相对丰富、成本低廉的植物多糖源已成为食品界、医学界关注的热点。海洋面积辽阔、海藻类植物来源丰富，其中除富含优质蛋白质、氨基酸、纤维素及矿物元素外，还含有多种生物活性多糖，并且海藻生存环境特异，海藻多糖具有独特的生理活性。作为医疗、保健用品已越来越引起世界各国的重视，海藻多糖正逐步成为生物多糖的主要来源之一。

小球藻(ChlorellapyrenoidosaFACHB5)是一类普生性单细胞藻类。小球藻具有生态分布广、可快速生长和繁殖、易于培养等优点，是地球上动植物中唯一能在20h增长4倍的生物，具有很高的应用价值。目前小球藻已经广泛地应用在动物饲料、食品添加剂、医药制剂、美容产品等方面。

现有技术如授权公告号为CN104311685B的中国发明专利，公开了一种螺旋藻多糖及其提取方法，包括以下步骤：将螺旋藻粉悬浊液反复冻融破壁后，离心获得细胞破碎液1和细胞碎片；在细胞破碎液1中加入硫酸铵至其饱和度为50％，盐析沉淀后，离心去除藻胆蛋白，获得上清液，将上清液与细胞碎片混匀，获得细胞破碎液2；采用热水浸提法获取螺旋藻多糖粗提物；将粗提物加入到乙醇/硫酸铵双水相体系中萃取，获得具有较高纯度的螺旋藻多糖的下相溶液；下相溶液经透析除盐后，用SephadexG-150层析柱和DEAESephadexA-50阴离子交换柱洗脱，获得纯螺旋藻多糖溶液；冷冻干燥后，制备成纯螺旋藻多糖成品。上述方法制备步骤繁琐，且提取过程中多糖活性容易被破坏，得到的产品质量不高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种制备步骤简单，原料来源广，价格低廉，提取率高的基于球藻提取物的复配物及其制备方法，得到的复配物中球藻多糖性质稳定，长期服用上述复配物可明显提高免疫力。

本发明针对背景技术中提到的问题，采取的技术方案为：基于球藻提取物的复配物，成分及其重量份为球藻提取物20~40份、玉米淀粉50~70份、阿拉伯胶5~10份、羧甲基淀粉20~30份、维生素C15~30份和叶酸3~6份。

基于球藻提取物的制备方法，包括冻融-超声处理、去蛋白、透析并醇沉、分离纯化和复配物的制备。上述方法制得的复配物中球藻提取物的性质稳定，且复配物中各成分相互协同作用，可提高白细胞的变形运动速度，缩短白细胞从血液中到达病原体所在组织的时间；同时可提高白细胞的吞噬能力和分泌白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子等多种细胞因子的能力。长期服用上述多糖后，感冒频率下降，人体免疫力得到明显的提高。复配物提高免疫力的效果均优于配方中任一单一成份。分离纯化步骤为采用凝胶层析的方法对粗多糖进行分离纯化，洗脱液为溶有活性多肽的水溶液。上述凝胶层析洗脱所用的洗脱液量少，有提高免疫力作用的功能多糖损失量少，洗脱的分离效果好。

活性多肽的含量为1~3g/L，活性多肽的氨基酸序列为SCASRCKSRCRACRRCKGYAAVSFGRCRCICKCFRC。上述活性多肽能明显提高功能多糖的K值，对其他多糖的K值影响不大，从而有效的将功能多糖分离纯化。功能多糖性质不稳定，容易受外界因素影响而失活，上述活性多肽可较好保护功能多糖的活性。

凝胶层析洗脱流速为0.2~0.7mL/min，收集在620nm处有吸收的洗脱液，浓缩并冷冻干燥得到球藻提取物。功能多糖在620nm处有较强吸收，且其他多糖在此处无吸收，根据这一特性对功能多糖进行富集。

冻融-超声处理步骤为取小球藻藻泥，加入磷酸缓冲液，反复超声冻融1~4次，离心取上清液，超声功率为400~700W，每次超声作用时间为4~7min。利用超声波产生的空化作用、机械作用加速小球藻细胞壁的破碎，促进胞内物质的溶出，提高多糖的提取率。

磷酸缓冲液与藻泥质量比为12~18，缓冲液浓度为0.04~0.08mol/L，pH为7.0~8.5。功能多糖在上述磷酸缓冲液中的溶解度高，且能较好的保持功能多糖的活性。

去蛋白步骤为在上清液中加入2~5%的三氯乙酸溶液，直至不再出现白色沉淀，离心取上清液。三氯乙酸是一种有机酸，可以使溶液中的蛋白质变性沉淀。上述方法操作简单、结果稳定、反应温和，在除蛋白时能很好的保证多糖的活性。