[发明专利]一种稳定的β2微球蛋白溶液、其制备方法及应用

说明书

本发明公开了一种稳定的β2微球蛋白溶液、其制备方法及应用，稳定的β2微球蛋白溶液包括检测用浓度水平的β2微球蛋白、Good’s缓冲液、氯化钠、甘油、牛血清白蛋白、稳定剂、防腐剂和蛋白酶抑制剂，所述Good’s缓冲液pH值为7.5至9.0，所述氯化钠浓度20～250mmol/L。本发明的β2微球蛋白溶液可应用于校准品和质控品，结合体外诊断试剂盒准确测定人体组织中β2微球蛋白的含量。其在4℃的有效期超过1年，开瓶稳定性超过1个月，结果准确，重复性好，开瓶即用，操作方便。

技术领域

本发明涉及医学检测技术领域，特别涉及一种稳定的β2微球蛋白溶液、其制备方法及应用。

背景技术

β2微球蛋白(β2-microglobulin，简称β2-MG)是由瑞典科学家 Berggard1968年首次从尿中分离纯化出来，分子量11800，等电点5.7，因电泳在β2区带而得名。β2-MG是一种小分子球状结构蛋白，存在于有核细胞的表面，与MHCI和CD1等蛋白质复合物结合在一起，对于蛋白质的运输和免疫反应的识别具有重要的作用。β2-MG可从细胞中排出以单体的形式存在于血液和尿液中，通常以较低的浓度水平存在。糖尿病患者或者高血压患者常常出现肾脏损伤的并发症，肾脏回收和代谢功能下降，血液和尿液中β2-MG会出现异常上升。因此，糖尿病和高血压患者血液和尿液中的β2-MG含量的上升经常预示着早期肾脏功能的损伤。血液中β2-MG的水平升高也可能是病毒性感染、骨髓瘤、骨髓增生等疾病导致。临床上检测血液或尿中的β2-MG浓度为临床肾功能测定、肾移植成活、糖尿病肾病、重金属镉、汞中毒以及某些恶性肿瘤的临床诊断提供早期、可靠和灵敏的指标。脑脊液中β2-MG的检测对脑膜白血病的诊断也有特别的意义。

目前，β2-MG含量的测定主要采用免疫比浊法或胶乳增强免疫比浊法，试剂通常为液体双试剂，在医院即开即用。而β2-MG的校准品常常为冻干粉，需要添加生理盐水现配现用。医院检验科为非洁净环境，配制试剂容易引入污染，造成蛋白质降解。而且，校准品溶解后，需要进行梯度稀释制备至少6个浓度水平的溶液，用于多点定标。校准品经生理盐水多次稀释后稳定性很差，无法长期存放，下次定标时需重新进行配制，费时费力，且价格昂贵、浪费严重。

发明内容

本发明的目的是克服上述技术缺陷，提供一种稳定的β2微球蛋白溶液，该溶液应用于校准品的制备可长期存放，多次使用，提高临床β2-MG含量的测定的效率，降低检测成本。

本发明一种稳定的β2微球蛋白溶液，包括检测用浓度水平的β2微球蛋白、 Good’s缓冲液、氯化钠、甘油、牛血清白蛋白、稳定剂、防腐剂和蛋白酶抑制剂，所述Good’s缓冲液pH值为7.5至9.0，所述氯化钠浓度20～250mmol/L。作为一种优选方式，Good’s缓冲液为三羟甲基甲胺基丙磺酸(TAPS)或者4- 羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)。

作为一种优选方式，所述甘油的体积百分比浓度为5％～25％。

作为一种优选方式，牛血清白蛋白的浓度为0.5～5g/L。

作为一种优选方式，所述稳定剂为浓度范围5～250mmol/L天冬氨酸镁、5～250mmol/L甘氨酸、5～250mmol/L丙氨酸中的一种或一种以上。

作为一种优选方式，防腐剂为质量百分比浓度为0.05％～0.2％的叠氮钠，或者Proclin300。

作为一种优选方式，蛋白酶抑制剂为浓度为0.5～2mmol/L的苯甲基磺酰氟 PMSF、浓度为0.5～5mmol/L的EDTA中的一种或两种。

作为一种优选方式，上述β2微球蛋白溶液中还含有表面活性剂，所述表面活性剂为终浓度为0.1～5mmol/L的胆酸钠,或0.5-2％的脂肪醇聚氧乙烯醚 AEO7。

作为一种优选方式，上述β2微球蛋白溶液中还含有赋形剂，所述赋形剂为浓度为0.1～10g/L聚乙二醇PEG6000。