[发明专利]一种人胎盘绒毛膜间充质干细胞培养体系有效
| 申请号： | 201710459851.6 | 申请日： | 2017-06-17 |
| 公开（公告）号： | CN107236705B | 公开（公告）日： | 2023-10-03 |
| 发明（设计）人： | 吴韶清;孙逊沙;欧志英;金宇林;李发涛;唐婕;吴洁莹;陈劲松;谢闺娥;陆琰;梁绮华;刘东 | 申请（专利权）人： | 广州市妇女儿童医疗中心(广州市妇幼保健院·广州市儿童医院·广州市妇婴医院·广州市妇幼保健计划生育服务中心) |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 谭英强 |
| 地址： | 510000 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 胎盘 绒毛 膜间充质 干细胞 培养 体系 | ||
1.一种人胎盘绒毛膜间充质干细胞培养体系，其特征在于，包括以下步骤：
(1)人胎盘绒毛膜组织处理后，进行初次培养，7天后更换培养基；
(2)初次培养瓶中的组织块、培养液和冲洗液离心后重新接种，进行再次培养，7天后更换培养基；
(3)再次培养瓶中的组织块、培养液和冲洗液离心后重新接种，进行第三次培养，7天后更换培养基；
(4)待三次培养细胞融合度达到80-90％时，用胰酶消化传代，即得人胎盘绒毛膜间充质干细胞。
2.根据权利要求1所述的一种人胎盘绒毛膜间充质干细胞培养体系，其特征在于，所述步骤(1)所述7天是指培养瓶置于培养箱中处于完全静止状态，不移动、不用显微镜观察和不进行培养液更换。
3.根据权利要求1所述的一种人胎盘绒毛膜间充质干细胞培养体系，其特征在于，所述步骤(1)所述更换培养基是指全量换液。
4.根据权利要求1所述的一种人胎盘绒毛膜间充质干细胞培养体系，其特征在于，所述步骤(2)所述初次培养瓶中的组织块、培养液和冲洗液是指初次培养7天后，第一次全量换液时，培养瓶中的组织块和培养液，以及用生理盐水冲洗培养瓶底的冲洗液。
5.根据权利要求1所述的一种人胎盘绒毛膜间充质干细胞培养体系，其特征在于，所述步骤(2)所述离心为1500r/min，5min。
6.根据权利要求1所述的一种人胎盘绒毛膜间充质干细胞培养体系，其特征在于，所述步骤(2)所述再次培养接种的培养瓶为初次培养接种培养瓶数量的一半。
7.根据权利要求1所述的一种人胎盘绒毛膜间充质干细胞培养体系，其特征在于，所述步骤(2)所述7天是指培养瓶置于培养箱中处于完全静止状态，不移动、不用显微镜观察和不进行培养液更换。
8.根据权利要求1所述的一种人胎盘绒毛膜间充质干细胞培养体系，其特征在于，所述步骤(2)所述更换培养基是指全量换液。
9.根据权利要求1所述的一种人胎盘绒毛膜间充质干细胞培养体系，其特征在于，所述步骤(3)所述再次培养瓶中的组织块、培养液和冲洗液是指再次培养7天后，第一次全量换液时，培养瓶中的组织块和培养液，以及用生理盐水冲洗培养瓶底的冲洗液。
10.根据权利要求1所述的一种人胎盘绒毛膜间充质干细胞培养体系，其特征在于，所述步骤(3)所述离心为1500r/min，5min。
11.根据权利要求1所述的一种人胎盘绒毛膜间充质干细胞培养体系，其特征在于，所述步骤(3)所述7天是指培养瓶置于培养箱中处于完全静止状态，不移动、不用显微镜观察和不进行培养液更换。
12.根据权利要求1所述的一种人胎盘绒毛膜间充质干细胞培养体系，其特征在于，所述步骤(3)所述第三次培养接种的培养瓶为再次培养接种培养瓶数量的一半。
13.根据权利要求1所述的一种人胎盘绒毛膜间充质干细胞培养体系，其特征在于，所述步骤(3)所述更换培养基是指全量换液。
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