[发明专利]一种细胞培养方法有效
| 申请号： | 201710447706.6 | 申请日： | 2017-06-14 |
| 公开（公告）号： | CN107083361B | 公开（公告）日： | 2020-12-15 |
| 发明（设计）人： | 林洁璇;王旭;林词雄;李陶;朱刚 | 申请（专利权）人： | 沃昕生物科技（深圳）有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 深圳市深佳知识产权代理事务所(普通合伙) 44285 | 代理人： | 王仲凯 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市宝安区新安*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 细胞培养 方法 | ||
1.一种细胞培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)分离外周血单个核细胞；
2)将步骤1)的分离外周血单个核细胞添加到含有血浆的 活化培养基中培养至第10天；所述活化培养基包括：抗CD16单克隆抗体、IL-2、抗坏血酸、TGF-β1、胸腺肽和无血清基础培养基；
所述活化培养基包括：
3)将增殖培养基添加到步骤2)中培养至第10天的外周血单个核细胞和含有血浆的活化培养基中培养直至回收细胞，所述增殖培养基包括：IL-1α、IL-2、抗坏血酸、IL-21、IL-7、4-1BBL和无血清基础培养基；
所述增殖培养基包括：
2.根据权利要求1所述的细胞培养方法，其特征在于，所述血浆在活化培养基培养中的体积百分比为4％。
3.根据权利要求1所述的细胞培养方法，其特征在于，所述无血清基础培养基为无血清RPMI1640培养基。
4.根据权利要求1所述的细胞培养方法，其特征在于，所述活化培养基包括：
5.一种活化培养基制备方法，其特征在于，所述活化培养基由抗CD16单克隆抗体、IL-2、抗坏血酸、TGF-β1和胸腺肽溶解于无血清基础培养基后经0.1μm滤膜过滤制得；
所述活化培养基包括：
6.根据权利要求1所述的细胞培养方法，其特征在于，所述增殖培养基包括：
7.一种增殖培养基制备方法，其特征在于，所述增殖培养基由IL-1α、IL-2、抗坏血酸、IL-21、IL-7和4-1BBL溶解于无血清基础培养基后经0.1μm滤膜过滤制得；
所述增殖培养基包括：
8.权利要求1、2、3、4、或6任意一项所述的细胞培养方法在促进NK细胞增殖中的应用。
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