[发明专利]一种基于癌细胞膜的仿生多功能纳米制剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种基于癌细胞膜的仿生多功能纳米制剂，其特征在于，由纳米药物颗粒内核和外层的癌细胞膜构成，其中：所述纳米药物颗粒内核由化疗药物和包覆在化疗药物外的光热治疗药物构成，其中：所述化疗药物为具有疏水性的阿霉素，所述光热治疗药物为具有两亲性的吲哚菁绿，所述癌细胞膜为对数期生长的宫颈癌细胞的细胞膜碎片；

所述仿生多功能纳米制剂通过以下方法制备：

(1)将化疗药物用微量注射器在避光条件下逐滴缓慢滴加到磁力搅拌的纯水中形成化疗药物的纳米粒子，搅拌20-40min；

(2)将光热治疗药物溶于水，并用微量注射器在避光条件下逐滴滴入到步骤(1)所述的纳米粒子溶液中搅拌，搅拌10-15h，光热治疗药物包覆在化疗药物的外部，得到纳米粒子内核，其中所述光热治疗药物与化疗药物的摩尔比为1:(2-3)；

(3)将步骤(2)得到的纳米粒子内核与癌细胞膜碎片分级挤出，其中所述纳米颗粒内核与癌细胞膜碎片按照质量比1：(3-4)的比例混合；

其中步骤(1)-(3)均在避光环境下进行。

2.如权利要求1所述的一种基于癌细胞膜的仿生多功能纳米制剂，其特征在于，所述纳米制剂具有规整的球形外观，平均粒径为220-240nm。

3.如权利要求1所述的一种基于癌细胞膜的仿生多功能纳米制剂，其特征在于，所述阿霉素为脱盐酸阿霉素。

4.如权利要求1所述的一种基于癌细胞膜的仿生多功能纳米制剂，其特征在于，所述步骤(1)中的化疗药物为脱盐的疏水阿霉素，所述步骤(2)中的光热治疗药物为吲哚菁绿，所述步骤(3)中的癌细胞膜为对数期生长的人宫颈癌细胞的细胞膜。

5.如权利要求1所述的一种基于癌细胞膜的仿生多功能纳米制剂，其特征在于，所述步骤(3)中的分级挤出包括以下步骤：将纳米颗粒内核与癌细胞膜碎片按照质量比1：3的比例混合，涡旋混合均匀，静置30-40分钟后先后经过1μm，0.85μm和0.45μm微孔滤膜分别过滤3-5次，即得到癌细胞膜包裹的仿生多功能纳米颗粒制剂。

6.如权利要求1所述的一种基于癌细胞膜的仿生多功能纳米制剂，其特征在于，所述步骤(3)中的癌细胞膜碎片的制备方法包括以下步骤：经低渗提取法破碎细胞膜去除内含物得到细胞膜碎片，再超声处理得到均匀的纳米级癌细胞膜碎片，全程冰浴放置。

7.如权利要求1所述的一种基于癌细胞膜的仿生多功能纳米制剂，其特征在于，所述步骤(3)中癌细胞膜采用低渗提取法，包括以下步骤：取对数期生长的人宫颈癌细胞，采用细胞刮刀将细胞刮下，700g离心收集细胞，等渗预冷的PBS洗涤，离心后，弃上清，加入低渗溶液冰浴15-20分钟，将冰浴后的细胞溶液在室温与液氮中反复冻融，直到细胞完全破碎，随后，700g离心得到上清液，14000g离心得到沉淀即为细胞膜碎片，上述细胞膜碎片-80℃--90℃冻干保存。