[发明专利]紫草素在制备治疗肺癌药物中的应用

说明书

技术领域：

本发明涉及含有机有效成分的医药配制品，具体涉及来紫草科紫草属植物的酮类化合物的抗肿瘤药物制剂。

背景技术：

肿瘤特别是恶性肿瘤是严重威胁人类生命健康的重大疾病之一，其对人类杀伤力仅次心脑血管病，位于全球第二，是目前世界各国仍然面临的重大疾病难题。据资料统计，我国癌症发病率在不到20年的时间里上升了69％，死亡率上升了29.4％；另有资料表示，自2010年后，癌症已成为我国死亡的主要原因和主要的公共健康问题。因此，寻找有效的癌症治疗药物，进一步完善临床治疗肿瘤体系，已成为当前迫切需要研究的问题。我国作为中草药大国，从中草药中提取分离获得有效抗肿瘤成分具有得天独厚的优势，相比于化学合成抗癌药物，从动植物中提取获得的天然抗肿瘤化合物往往具有高效、低毒、稳定、种类多等特点。

紫草属紫草科多年生草本植物。紫草最早记载于《神农本草经》，为防治麻疹的中药。作为传统中药材，紫草使用历史悠久，它具有消炎、解热和收敛功效，药用其根，已应用于临床，疗效确切。近年来，基于中药现代药理学发展研究，发现紫草具有抗肿瘤活性，能够抑制多种肿瘤细胞的生长。

紫草素是从紫草中提取的酮类化合物，其化学名称为5,8-二羟基-2-[(1R)-1-羟基-4-甲基戊-3-烯基]萘-1,4-二酮，分子量为288.31；紫草素是紫红色带有金属光泽的针状晶体，微溶于水，易溶于二甲基亚砜、乙醇、乙醚等有机溶剂。紫草素具有抗炎、抗菌、抗病毒等方面的生物活性。但目前尚未见紫草素可诱导癌细胞衰老发挥抗肿瘤作用的报道。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是提供紫草素的新用途，即在制药中的新用途。

上述紫草素的新用途是，紫草素在制备治疗肺癌药物中的应用，其中所述的紫草素的化学结构式如下式(Ⅰ)所示，

上述应用中，所述的药物由紫草素和医学上可接受的辅料组成。

上述应用中，所述的药物为片剂、颗粒剂或喷雾剂。

本发明所述应用中的紫草素可有效激活癌细胞内P53通路，诱导癌细胞衰老，发挥治疗肺癌的功效。

附图说明：

图1为肺癌细胞活力与紫草素的浓度关系曲线。

图2为紫草素上调肺癌细胞内p53蛋白表达水平的电泳图。

图3为不同浓度的紫草素诱导肺癌细胞衰老的显微照片。

图4为紫草素抑制移植瘤生长的效果图，其中，左图为裸鼠体重变化曲线，右图为不同给药方式移植瘤大小变化曲线。

图5为紫草素上调移植瘤中p53蛋白表达水平的显微照片。

图6为紫草素诱导移植瘤细胞衰老的显微照片。

具体实施方式：

实验例1：紫草素对肺癌细胞活力的抑制效果

细胞生长状态较好时，以2000个/孔接种于96孔板中，过夜培养，待细胞贴壁状态较好时，弃去原来的培养基，接着按照设计的药物浓度：紫草素浓度0,1,2,4,6,8μM进行换液给药作用于A549细胞72h后终止培养，吸走培养基，加入100μl0.5mg/ml的MTT溶液，37℃培养4～6小时，弃MTT溶液，最后加入150μl的DMSO震荡混匀，置于酶标仪中，于490nm测定波长处检测吸光度值。结果如图1所示，紫草素可明显抑制肺癌细胞A549的生长。

实验例2：紫草素上调肺癌细胞内p53蛋白表达水平

取对数生长期A549细胞，以6×104个/孔接种于6孔培养板中，过夜培养，待细胞贴壁状态较好时，弃去培养基，加入含不同浓度紫草素(0、1、2μM)的新鲜培养基继续培养72h后，消化、收集细胞、离心、PBS洗涤2次，洗掉上清，然后加入适量RIPA和1％的蛋白酶抑制剂PMSF，裂解细胞45min后，收集上清液并测定蛋白含量，使用Western blotting的方法检测p53蛋白的表达情况。结果如图2所示，紫草素作用于A549细胞后可明显上调细胞内p53蛋白表达水平。

实验例3：紫草素诱导肺癌细胞衰老