[发明专利]去细胞角膜基质透镜及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及组织工程学技术领域，尤其是涉及一种去细胞角膜基质透镜及其制备方法。

背景技术

远视是平行光线进入眼内后在视网膜之后的一种屈光状态，当眼球的屈光力不足或其眼轴长度不足时就产生远视。远视作为眼科疾病的一种，极大的影响了人们的生活质量，尤其是随着年龄的增大，远视的发生几率也会升高。

远视是临床常见的屈光不正眼病，高度远视的矫正一直是屈光治疗的难题。目前远视矫正治疗的方法主要包括框架眼镜、角膜接触镜或者屈光手术。

老视是一种生理现象不是病理状态也不属于屈光不正，是人们步入中老年后必然出现的视觉问题。随着年龄的增长，出现老视的患者必须增加凸透镜才能获得清晰的近视力。

目前，植入式的角膜接触镜多采用合成材料制成，可以根据不同患者的屈光状态生产出各种度数和型号大小的透镜，术后视力恢复快，但其弊端也比较明显，比如：术后可能出现散光增加，早期可能出现角膜雾状浑浊；而且其适用症有限，并存在角膜瓣相关风险，在长期植入过程中可能出现角膜损伤，视觉质量下降的情况；另外，其安全性较低，属于永久性异物，在长期植入过程中可能出现免疫排斥反应。因此，对于高度远视、老视及合并屈光参差的患者，需要找到适应症更广、安全性更高、预测性更强、稳定性更佳的透镜材料。

对于角膜基质移植所需的材料而言，不仅要求有良好的光学特性，还要求与人眼组织有良好的组织相容性，人工合成材料则在生物组织相容性上有很大的弊端，而利用动物源性的角膜，则能够在很大程度上缓解人工合成材料的组织相容性差的问题。

但使用动物源性角膜也存在着一些问题，例如：(1)虽然动物源性角膜的组织相容性较好，但如果其自身细胞去除不完全，则会存在产生免疫反应的风险；(2)此外，虽然目前已有一些去除角膜基质细胞的方法，但是现有的角膜去细胞基质制备工艺容易导致角膜吸水肿胀，导致基质中的胶原纤维排列或构象发生改变，使角膜基质透明度下降，原始形态、曲率等发生改变；(3)而且，传统的角膜透镜通常是以特殊的角膜刀切削制得，工艺相对粗糙，可能造成削切面不够光滑，或者透镜部分丢失，预测性和安全性较差，且术后近期并发症，如散光等发生率较高。

因此，如何获得安全性更高、透明度更佳和性能更稳定的角膜基质透镜，仍需要进行不断的研究。安全、有效的人角膜基质的处理方法，在实际临床应用中，具有重大的意义。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一个目的在于提供一种去细胞角膜基质透镜的制备方法，本发明的第二个目的在于提供去细胞角膜基质透镜，以缓解现有技术中存在的角膜透镜安全性低、透明度差和性能不稳定的技术问题。

本发明提供了一种去细胞角膜基质透镜的制备方法，包括：将带有细胞的角膜基质透镜依次进行细胞裂解和交联处理，然后经过灭菌后得到所述去细胞角膜基质透镜。

进一步的，所述细胞裂解的方法包括：用含有0.1％-3％TritonX-100的0.9％的生理盐水或磷酸盐缓冲溶液浸泡12-48h，然后用0.9％生理盐水或磷酸盐缓冲溶液漂洗48-96h。

进一步的，所述交联的方法包括：用含有交联剂的0.9％生理盐水或磷酸盐缓冲溶液中浸泡，然后用0.9％生理盐水或者磷酸盐缓冲溶液漂洗24-96h，所述交联剂为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、N-羟基硫代琥珀酰亚胺、京尼平或者戊二醛。

进一步的，所述交联剂的使用量与角膜基质透镜的质量比为1:1-1:15。

进一步的，所述交联剂的使用量与角膜基质透镜的质量比为1:5-1:10。

进一步的，在所述细胞裂解处理之前，还包括消毒处理，所述消毒的方法包括：用含有浓度为0.01～0.1mg/ml青霉素和浓度为0.05～0.5mg/ml链霉素的生理盐水浸泡1-5h，然后用0.9％生理盐水或磷酸盐缓冲溶液漂洗。

进一步的，在所述交联处理之后，还包括灭菌处理，所述灭菌的方法包括：用γ射线进行辐照，辐照剂量为20～30kGy。

进一步的，所述带有细胞的角膜基质透镜是通过全飞秒激光技术获得的。

进一步的，所述制备方法包括：

步骤(a)，消毒：将通过全飞秒激光技术获得带有细胞的准确厚度的角膜基质透镜，用含有浓度为0.01～0.1mg/ml青霉素和浓度为0.05～0.5mg/ml链霉素的生理盐水浸泡1-5h，然后用0.9％生理盐水或磷酸盐缓冲溶液漂洗；