[发明专利]去细胞角膜基质透镜及其制备方法在审
申请号: | 201710403038.7 | 申请日: | 2017-05-31 |
公开(公告)号: | CN107233143A | 公开(公告)日: | 2017-10-10 |
发明(设计)人: | 梁丽金;杨习锋;曾晨光;余克明;庄菁 | 申请(专利权)人: | 广州新诚生物科技有限公司 |
主分类号: | A61F2/16 | 分类号: | A61F2/16;A61L27/36 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙)11371 | 代理人: | 吴开磊 |
地址: | 510000 广东省广州市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 角膜 基质 透镜 及其 制备 方法 | ||
1.一种去细胞角膜基质透镜的制备方法,其特征在于,包括:将带有细胞的角膜基质透镜依次进行细胞裂解和交联处理,然后经过灭菌后得到所述去细胞角膜基质透镜。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述细胞裂解的方法包括:用含有0.1%-3%TritonX-100的0.9%的生理盐水或磷酸盐缓冲溶液浸泡12-48h,然后用0.9%生理盐水或磷酸盐缓冲溶液漂洗48-96h。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述交联的方法包括:用含有交联剂的0.9%生理盐水或磷酸盐缓冲溶液中浸泡,然后用0.9%生理盐水或者磷酸盐缓冲溶液漂洗24-96h,所述交联剂为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、N-羟基硫代琥珀酰亚胺、京尼平或者戊二醛。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述交联剂的使用量与角膜基质透镜的质量比为1:1-1:15。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述交联剂的使用量与角膜基质透镜的质量比为1:5-1:10。
6.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,在所述细胞裂解处理之前,还包括消毒处理,所述消毒的方法包括:用含有浓度为0.01~0.1mg/ml青霉素和浓度为0.05~0.5mg/ml链霉素的生理盐水浸泡1-5h,然后用0.9%生理盐水或磷酸盐缓冲溶液漂洗。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,在所述交联处理之后,还包括灭菌处理,所述灭菌的方法包括:用γ射线进行辐照,辐照剂量为20~30kGy。
8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,所述带有细胞的角膜基质透镜是通过全飞秒激光技术获得的。
9.根据权利要求8所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括:
步骤(a),消毒:将通过全飞秒激光技术获得带有细胞的准确厚度的角膜基质透镜,用含有浓度为0.01~0.1mg/ml青霉素和浓度为0.05~0.5mg/ml链霉素的生理盐水浸泡1-5h,然后用0.9%生理盐水或磷酸盐缓冲溶液漂洗;
步骤(b),细胞裂解:用含有0.1%-3%TritonX-100的0.9%生理盐水或磷酸盐缓冲溶液浸泡12-48h,然后用0.9%的生理盐水漂洗48-96h;
步骤(c),交联:用含有交联剂的0.9%生理盐水或磷酸盐缓冲溶液中浸泡,然后用0.9%生理盐水或者磷酸盐缓冲溶液漂洗24-96h,所述交联剂为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺,或N-羟基硫代琥珀酰亚胺、或戊二醛、或京尼平;所述交联剂的使用量与所述经过细胞裂解处理的角膜基质透镜的质量比为1:1-1:15;
步骤(d),灭菌:用γ射线进行辐照,辐照剂量为20~30kGy。
10.按照权利要求1-9任一项所述的制备方法得到的去细胞角膜基质透镜。
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