[发明专利]一种建立云瑞系列玉米品种DNA分子标签的方法

权利要求书

1.一种建立云瑞系列玉米品种DNA分子标签的方法，包括(1)云瑞系列玉米品种基因组DNA提取、(2)PCR扩增、(3)PCR产物的毛细管电泳荧光检测、(4)DNA指纹数据的获得、(5)云瑞系列玉米品种基本商品信息数据的采集、(6)云瑞系列玉米品种DNA分子标签制作，其特征在于：在所述(2)PCR扩增中每一个云瑞系列玉米品种提取的基因组DNA，分别用引物bnlg1191、bnlg1940k7、umc2007y4、bnlg2305k4进行扩增，所述的引物bnlg1191由bnlg1191正向引物和bnlg1191反向引物组成，所述的bnlg1191正向引物的碱基序列如SEQ ID NO：1所示，bnlg1191反向引物的碱基序列如SEQ ID NO：2所示；所述引物bnlg1940k7由bnlg1940k7正向引物和bnlg1940k7反向引物组成，所述bnlg1940k7正向引物的碱基序列如SEQ ID NO：3所示，bnlg1940k7反向引物的碱基序列如SEQ ID NO：4所示；所述引物umc2007y4由umc2007y4正向引物和umc2007y4反向引物组成，所述umc2007y4正向引物的碱基序列如SEQ ID NO：5所示，umc2007y4反向引物的碱基序列如SEQ ID NO：6所示；所述引物bnlg2305k4由bnlg2305k4正向引物和bnlg2305k4反向引物组成，所述bnlg2305k4正向引物的碱基序列如SEQ ID NO：7所示，bnlg2305k4反向引物的碱基序列如SEQ ID NO：8所示；

在所述(4)DNA指纹数据的获得中每一个云瑞系列玉米品种的DNA指纹数据的获得是根据毛细管荧光电泳读出的该云瑞系列玉米品种4个位点的等位变异片段大小数据，纯合位点的等位变异记录为X/X，以X/X的形式表示其DNA指纹数据，杂合位点的等位变异记录为X/Y，以X/Y的形式表示其DNA指纹数据，其中X、Y为该位点上两个不同的等位变异片段大小数据，小片段在前，大片段在后，以两个片段大小记录；每一个云瑞系列玉米品种的DNA指纹数据X/Y或X/Y依次按引物bnlg1191、引物bnlg1940k7、引物umc2007y4、引物bnlg2305k4的引物顺序排列；

在所述(5)云瑞系列玉米品种基本商品信息数据的采集中每一个云瑞系列玉米品种所采集的基本商品信息数据包括作物种类、品种植物学类型、品种繁殖类型、品种名称、单元识别代码、审定区域和审定的年份，所述的单元识别代码是用1、2、3……自然数中的任意数表示，且不同的云瑞系列玉米品种的单元识别代码均不相同；

所述步骤(6)云瑞系列玉米品种DNA分子标签制作是将同一云瑞系列玉米品种在步骤(4)获得的DNA指纹数据和在步骤(5)所采集的基本商品信息数据输入二维码生成器生成二维码图形即为云瑞系列玉米品种DNA分子标签；

步骤(2)PCR扩增的反应体系为：10μL的反应体积，其中1μL 10×PCR反应缓冲液，0.6μL25mmol/L MgCl₂，0.8μL 2.5mmol/L dNTP溶液，0.25μL 5μmol/L正向引物，0.25μL 5μmol/L反向引物，0.25μL 2U/μL Taq DNA聚合酶，5.85μL超纯水，1μL样品DNA；PCR扩增的反应程序：94℃预变性5min，1个循环；94℃变性40s，60℃退火35s，72℃延45min，共30个循环；72℃延伸5min，4℃保存。

2.根据权利要求1所述的一种建立云瑞系列玉米品种DNA分子标签的方法，其特征在于：步骤(5)云瑞系列玉米品种基本商品信息数据的采集中所采集的基本商品信息数据还包括生产经营者名称。

3.根据权利要求2所述的一种建立云瑞系列玉米品种DNA分子标签的方法，其特征在于：步骤(5)云瑞系列玉米品种基本商品信息数据的采集中所采集的基本商品信息数据还包括追溯网址。

4.根据权利要求1或2所述的一种建立云瑞系列玉米品种DNA分子标签的方法构建的云瑞系列玉米品种DNA分子标签。

5.根据权利要求3所述的一种建立云瑞系列玉米品种DNA分子标签的方法构建的云瑞系列玉米品种DNA分子标签。