[发明专利]编码嵌合抗原受体蛋白的核酸及表达嵌合抗原受体蛋白的T淋巴细胞

权利要求书

1.编码一种表达于人T细胞表面的嵌合抗原受体蛋白的核酸，所述嵌合抗原受体蛋白包含顺序连接的胞外结合区，跨膜区和胞内信号区，其中所述胞外结合区包含特异性识别人表皮生长因子受体EGFR的第287-302位氨基酸表位的单链抗体scFv(EGFR)。

2.如权利要求1所述的核酸，其中跨膜区选自包含CD8或CD28的跨膜区和铰链区的序列。

3.如权利要求1或2所述的核酸，其中胞内信号区选自CD3ζ，FcεRIγ，CD28，CD137，CD134的胞内信号区序列，及其组合。

4.如权利要求3所述的核酸，其中所述嵌合抗原受体蛋白是选自包含顺序连接的胞外结合区，跨膜区和胞内信号区的如下的嵌合抗原受体蛋白：

scFv(EGFR)-CD8-CD3ζ，

scFv(EGFR)-CD8-CD137-CD3ζ，

scFv(EGFR)-CD28-CD28-CD3ζ，

scFv(EGFR)-CD28-CD28-CD137-CD3ζ，

及其组合，其中相关嵌合抗原受体蛋白中的第一个CD28代表其跨膜区，第二个CD28代表其胞内信号区。

5.如权利要求1-4任一所述的核酸，所述核酸选自编码具有SEQ ID NO:31～34之一序列的嵌合抗原受体蛋白的核酸。

6.如权利要求1-4任一所述的核酸，所述核酸编码与SEQ ID NO:31～34所示的序列竞争结合EGFR的第287-302位的氨基酸序列。

7.如权利要求1-4任一所述的核酸，所述单链抗体含有SEQ ID NO:31或32中第1-240所示的氨基酸序列或者含有SEQ ID NO:33或34中第1-240所示的氨基酸序列。

8.核酸或核酸变体，其编码具有下组中任一所述的氨基酸序列：

序列(1)，与SEQ ID NO:31具有至少80％相似性的氨基酸序列；

序列(2)，与SEQ ID NO:32具有至少80％相似性的氨基酸序列；

序列(3)，与SEQ ID NO:33具有至少80％相似性的氨基酸序列；

序列(4)，与SEQ ID NO:34具有至少80％相似性的氨基酸序列。

9.如权利要求8所述的核酸或核酸变体，其编码含有下组中任一所述序列的氨基酸序列：

序列(1)，与SEQ ID NO:31具有至少90％相似性的氨基酸序列；

序列(2)，与SEQ ID NO:32具有至少90％相似性的氨基酸序列；

序列(3)，与SEQ ID NO:33具有至少90％相似性的氨基酸序列；

序列(4)，与SEQ ID NO:34具有至少90％相似性的氨基酸序列。

10.如权利要求1-7任一所述的核酸，具有SEQ ID NO:1～4之一所示的序列或具有SEQ ID NO:1～4之一所示的序列的变体序列。

11.如权利要求10所述的核酸，所述变体序列选自下组中的核酸序列：

序列(1)，与SEQ ID NO:1具有至少80％相似性的氨基酸序列；

序列(2)，与SEQ ID NO:2具有至少80％相似性的氨基酸序列；

序列(3)，与SEQ ID NO:3具有至少80％相似性的氨基酸序列；

序列(4)，与SEQ ID NO:4具有至少80％相似性的氨基酸序列。

12.包含权利要求1-11之一所述的核酸的载体。

13.如权利要求12所述的载体，该载体来自慢病毒质粒pWPT-eGFP。

14.包含权利要求1-11任一所述的核酸或包含有权利要求12或13所述载体的病毒。

15.一种转基因T淋巴细胞，其被转导有权利要求1-11任一所述的核酸或权利要求12或13所述的载体或权利要求14所述的病毒。

16.一种转基因T淋巴细胞，其表面表达一种嵌合抗原受体，所述嵌合抗原受体由权利要求1-11任一所述的核酸编码表达。