[发明专利]丙型肝炎病毒NS5B聚合酶抑制剂

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药领域，特别是涉及一种丙型肝炎病毒NS5B聚合酶抑制剂。

背景技术

丙型肝炎病毒(HCV)感染是肝硬化和肝细胞癌导致肝功能衰竭的原因之一。估计世界人口有2～3％感染慢性丙型肝炎病毒。HCV是一种编码单链抗体的单链RNA病毒，它可裂解为结构蛋白和非结构蛋白。非结构蛋白在病毒复制中起重要作用，成为HCV化疗的靶点。目前的治疗包括聚乙二醇干扰素为基础的治疗和α/利巴韦林联合直接作用的抗病毒药物。NS5B作为HCV RNA复制必要的关键酶，可为妨碍HCV病毒复制过程中为小分子抑制剂的筛选设计一个有趣的目标。

从化合物库中进行高通量筛选，可发现一个IC₅₀为11μM的NS5B抑制剂的噻唑酮衍生物，并以先导化合物为基础，设计合成了1000多种化合物。在这一过程中，抗HCV NS5B聚合酶的IC₅₀为0.6μM的化合物1被确定，然而，在细胞检测中，化合物1显示的EC₅₀为35μM，这和其他化合物一样在细胞试验中是无效的。这些化合物缺乏良好的EC₅₀可能是由于他们的不稳定性或穿过细胞膜的运输能力差。而经研究发现，化合物1的左部分是在体外酶分析中保留活性必不可少的部分。因此，可用磺胺类化合物替代氨基酸右侧部分，如2a-2i设计并研究其活性，然而研究结果却显示，在氨基酸衍生物的细胞试验中，2a-2i并没有表现出对HCV NS5B聚合酶显著的抑制活性。

药物或前药的氨基酸部分通常有助于药物通过生物膜运输，提高药物的生物利用度。因此，预测连接噻唑衍生物而没有磺胺基团的氨基酸，可能能在细胞试验中展示对HCV NS5B聚合酶更好的抑制活性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种对抗丙型肝炎病毒NS5B聚合酶活性具有显著作用的抑制剂。

本发明所采取的技术方案是：一种如式(Ⅰ)的化合物：

其中，

R为乙基、丙基、正丁基、异丙基、烯丙基或叔丁基二甲基硅烷基。

本发明采用如下方法制备上述如式(Ⅰ)的化合物：

1)、将化合物2，其结构式为溶于乙酸或乙酸盐溶液中，并加入室温下搅拌2～12h，将所得的产物过滤，得中间产物a，其结构式为其中该步骤中的R均为乙基、丙基、正丁基、异丙基、烯丙基或叔丁基二甲基硅烷基；

2)、将中间产物a溶于THF溶剂中并加入碘甲烷，再加入三乙胺，室温下搅拌2～5h小时，蒸去溶剂，将得到的残余物进行硅胶柱层析分离，得到中间产物b，其结构式为其中该步骤中的R为乙基、丙基、正丁基、异丙基、烯丙基或叔丁基二甲基硅烷基；

3)、将中间产物b溶于CH₂Cl₂溶剂中，加入蒸去溶剂，将得到的残余物进行硅胶柱层析分离，得到如式(Ⅰ)的化合物。

作为上述方案的进一步改进，本发明提供一种化合物2的制备方法：

1)、将化合物3，其结构式为溶于干燥的四氢呋喃中，加入叔丁基二甲烷和三乙基胺，反应物室温下搅拌2～12h，蒸发溶解，将得到的产物进行硅胶柱层析分离，得到中间产物c，其结构式为其中该步骤中的R为溴基或氢原子；

2)、将中间产物c溶于干燥的DTHF溶剂中，在-50℃时，加入正丁基锂，搅拌2～12min后加入碘衍生物，并保持在-50℃环境下搅拌2～5h，然后让反应慢慢升温到室温，加入乙醇，待正丁基锂反应完全后蒸去溶剂，加入二氯甲烷和氯化钠水溶液，分出有机层，蒸去溶剂，将得到的产物进行硅胶柱层析分离，得到中间产物d，其结构式为其中该步骤中的R₁为丙基、正丁基、异丙基、烯丙基或叔丁基二甲基硅烷基；

3)、将中间产物d溶于四氢呋喃，在室温下加入TBAF溶剂，并搅拌2～5h，蒸去溶剂，将残余物进行硅胶柱层析分离，得到中间产物e，其结构式为其中该步骤中的R₁为丙基、正丁基、异丙基、烯丙基或叔丁基二甲基硅烷基；

4)、将中间产物e溶于干燥的THF溶剂中，加入Dess Matin氧化剂，并在室温下搅拌2～5h，过滤，将得到的溶液蒸干，并进行硅胶柱层析分离，得到化合物2，其结构式为其中该步骤中的R₁为丙基、正丁基、异丙基、烯丙基或叔丁基二甲基硅烷基。

本发明所采取的另一个技术方案是：一种如式(Ⅱ)的化合物：

其中，