[发明专利]一种检测卡那霉素的比色检测探针及其检测方法

说明书

本发明涉及一种检测卡那霉素的比色检测探针，其制备方法包括如下步骤：(1)将氨基化适配体Apt与氨基化的磁珠MB在偶联剂的作用下结合成捕获探针；(2)将单链DNA结合蛋白SSB修饰到合成好的金属有机框架MOF‑Pt复合材料的表面来形成信号探针；(3)将步骤1的捕获探针和步骤2的信号探针通过单链DNA结合蛋白和适配体Apt之间的亲和性形成复合探针，还提供了该探针在检测卡那霉素的方法，该检测方法不需要依赖大型仪器设备，且具有较低的检测限，同时，该比色检测探针还表现出良好的特异性和选择性，该方法操作简单快速，借助手持型比色计就可以实现卡那霉素残留的现场检测，并且实验结果肉眼可视。

技术领域

本发明涉及环境科学、检验化学及分析化学领域，具体涉及一种基于无酶催化的比色方法检测牛奶中卡那霉素残留的比色检测探针及其检测方法。

背景技术

卡那霉素(KANA)作为一种小分子药物，敏感菌所致的肠道感染及用作肠道手术前准备，并有减少肠道细菌产生氨的作用，对肝硬化消化道出血病人的肝昏迷有一定防止作用。但是当人体内的KANA累积到一定程度的时候就会产生一定的副作用，比如红斑皮疹，听力减退、耳鸣或耳部饱满感(耳毒性)以及肾毒症等，并且长期体内积累的KANA会让人产生抗药性从而对人体健康构成巨大的威胁。

目前，已经开发了许多检测KANA的方法，常见的有比色法，荧光法(FL)，电化学法(EC)，电化学发光法(ECL)以及高效液相色谱法(HPLC)。其中比色法由于其简单的构建方式以及可以快速反馈结果的优势得到了许多研究者的青睐。更重要的是该方法还具有结果肉眼可视性的优点，利用肉眼就可辨别实验结果，使得实验结果更简单、直观。并且在测定过程中不需要使用大型仪器非常容易推广，有很好的普遍性，在现场快速检测方面具有很好的应用和发展前景。但是常见的比色方法是通过辣根过氧化酶来催化一些底物显色实现目标物检测，但是酶的活性非常容易受到外界条件的干扰。因此，建立一种无酶催化底物显色的比色方法是非常有必要的。

发明内容

本发明所要解决的一个技术问题是针对现有技术的现状提供一种无酶快速检测卡那霉素的比色检测探针。

本发明所要解决的另一个技术问题是针对现有技术的现状提供一种利用上述比色检测探针快速检测牛奶中卡那霉素的方法。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：本检测卡那霉素的比色检测探针，其特征在于：其制备方法包括如下步骤：

(1)将氨基化适配体Apt与氨基化的磁珠MB在偶联剂的作用下结合成捕获探针MB-Apt；所述氨基化适配体Apt的序列为5’-NH₂(CH₂)₆-AGA TGG GGG TTG AGG CTA AGC CGA-3’；

(2)将单链DNA结合蛋白SSB修饰到合成好的金属有机框架MOF-Pt复合材料的表面来形成信号探针MOF-Pt-SSB；

(3)将步骤1的捕获探针和步骤2的信号探针通过单链DNA结合蛋白和适配体Apt之间的亲和性形成复合探针MB-Apt-SSB-MOF-Pt。

进一步地，所述步骤(2)中的金属有机框架MOF-Pt复合材料的合成步骤为：

(1)先合成含铁金属有机骨架化合物Fe-MIL-88；

(2)再合成PVP功能化的Pt NPs；

(3)最后将步骤(2)的Pt NPs-PVP滴入步骤(1)中的Fe-MIL-88溶液中反应2～7h，Pt NPs-PVP与Fe-MIL-88的配比为1:2～4:1，最后离心收集MOF-Pt复合材料；