[发明专利]一种同步提取植物RNA和多糖的方法

权利要求书

1.一种同步提取植物RNA和多糖的方法，其特征在于：将水溶性RNA提取液加入经研磨或裂解处理后的植物样品中，充分混合，经离心，取上清液作为RNA样品进行进一步RNA分离和纯化；其剩余的液体和植物样品残留物作为糖提取样品，进一步进行糖的提取和纯化；

所述提取植物多糖的方法如下：

1）将完成RNA提取后残渣及废液收集在15 ml离心管内，加 1 ml 的Mili-Q H₂O，沸水浴30 min；

2）置离心机常温，7830 rpm，离心15 min，取上清液转至 20 ml刻度管；

3）沉淀加 1 ml Mili-Q H₂O，沸水浴30 min，7830 rpm，离心15 min，取上清液至 20 ml刻度管，该步骤重复一次；

4）沉淀加 1 ml Mili-Q H₂O漂洗残渣，7830 rpm离心15 min，取上清液至 20 ml 刻度管；

5）上清液用Mili-Q H₂O定容至 10 ml；

6）加 5 ml石油醚于溶液中，台式恒温振荡器常温 200 rpm，10 min；7700 rpm，离心15 min，弃上层溶液；

7）下层溶液加氯仿:正丁醇溶液 2 ml，氯仿:正丁醇体积比5:1，混匀至乳浊状，静置分层10 min后，7700 rpm，离心 10 min；

8）取 50 μL上层溶液置 20 mL 离心管中，Mili-Q H₂O定容至2 ml；

9）加 1ml 9 wt.%苯酚溶液，摇匀；加 5 ml浓硫酸，摇匀，室温下静置 30 min，7700rpm，离心 10 min；

10）取3 ml上清液于比色皿中，以双蒸水为空白对照于分光光度计 485 nm 处比色；

11）根据吸光值Y、糖浓度x绘制标准曲线，Y=Ax-B，计算得到所测植物样品材料的多糖含量的表观数值，其中A和B为常数，x单位为：mg/L；

计算常规提取方法多糖测量值P1：P1=[(Y1+B)/A*10*40*10^-3*10^-3]/干重（B1）*100；

计算同步提取法多糖测量值P2：P2=[(Y2+B)/A*10*40*10^-3*10^-3]/干重（B2）*100；

12）根据每一种材料提取多糖的传统方法提取结果和同步提取结果所测定的关联比例系数C2算出同步提取方法多糖的测量读数相当于传统方法提取多糖的量，C2=P2/P1。

2.根据权利要求1所述的一种同步提取植物RNA和多糖的方法，其特征在于：所提取的植物多糖和RNA来源于同一个完全相同的植物材料，即相同的细胞、组织和器官。