[发明专利]检测经硫磺熏蒸的土茯苓及其制品的方法

说明书

本发明公开了一种检测经硫磺熏蒸的土茯苓或其制品的方法，包括以下步骤：步骤一、制备经硫磺熏蒸的土茯苓或其制品的样品溶液a和未经硫磺熏蒸的土茯苓或其制品的样品溶液b；步骤二、采用超高效液相色谱‑四极杆‑飞行时间质谱联用的方法分别对样品溶液a和样品溶液b进行质谱数据采集，其中选用的碰撞电压为35～50V；步骤三、采用多元统计分析的方法，对比确定样品溶液a相比于样品溶液b中出现的差异成分的质谱数据即为包含标志性硫化产物或其碎片的质谱数据。本发明首次实现了硫磺熏蒸土茯苓及其制品的快速检测，同时样品处理方法简便、分析时间短、特异性强、检测结果准确。

技术领域

本发明涉及中药检测领域。更具体地说，本发明涉及一种检测经硫磺熏蒸的土茯苓及其制品的方法。

背景技术

土茯苓为百合科菝葜属植物光叶菝葜的干燥根茎，是药食两用资源，归肝、胃经，具有除湿、解毒、通利关节等功效。现代研究表明土获苳具有广泛的药理活性，主要表现在心血管药理作用、抗肿瘤、抗炎、免疫调节、抗氧化、抑菌、降尿酸、保护肾功能等方面，临床上主要用于治疗微生物感染、泌尿生殖系统、结缔组织系统、皮肤病、消化系统等方面的疾病。民间常用土茯苓食补或作为保健品，尤其在中国南方，还普遍作为汤料用于煲汤。此外，土茯苓还是龟苓膏的重要原材料，龟苓膏作为一种传统特色功能食品，受到中国、日本、韩国、新加坡等东南亚国家普遍欢迎。

研究表明，土茯苓中主要含有黄酮类、二苯乙烯、苯丙素类等成分，并表现出多种生物活性，如落新妇苷具有利尿、镇痛、抗炎，免疫抑制、抗肿瘤等活性,主要黄烷醇类成分，表儿茶素具有抗氧化、调节血脂水平、抗肿瘤等活性，5-O-咖啡酰基莽草酸及黄杞苷均有抗肿瘤、抗氧化作用。

随着土茯苓用量和贮存量的增加，民间种植散户沿用传统硫磺熏蒸养护的现象仍较普遍。适量的硫磺熏蒸可以达到防虫防霉的目的，但一些药农和经销商为了追求经济利益，用工业硫磺长期反复熏蒸已经严重影响了药材的质量。现代研究证明硫磺熏蒸前后中药材及饮片的性状多有改变，并且会使其中残留大量的二氧化硫及砷、汞等重金属，对人体具有多种危害；由于二氧化硫是一种强还原剂，可能与中药材中含有羰基，羧基的成分发生化学反应，导致有效成分的损失，因此可能改变药物的性味，降低药物疗效，从而直接影响中药饮片的品质。2012年，广州查获一批“毒土茯苓”，黑工厂将经有毒硫磺熏制得到的“毒土茯苓”大量流入市场，作为汤料进入人们的日常生活中。据报道，食用硫磺熏蒸过的中药材、食物等会对消化道和呼吸系统粘膜造成损害，导致呕吐、腹泻、恶心等症状，严重的甚至会危害人的肝脏、肾脏。有些劣质硫磺的铅、汞等重金属含量超标，长期食用会引起慢性中毒。

如何正确认识和处理硫磺熏蒸问题，关系中药材品质安全，因此，亟待建立快速、有效的检测硫磺熏蒸土茯苓及其制品的方法。

前期研究表明，硫磺熏蒸能够导致土茯苓中主要活性成分的含量降低。2015版《中国药典》收载的土茯苓的品质评价标准主要包括性状、鉴别、检查、含量测定等几个方面，其中落新妇苷不得少于0.45％。目前已有的报道中尚无关于硫磺熏蒸后土茯苓化学成分的变化的研究，对硫磺熏蒸土茯苓药材的快速检测方法尚未见报道。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种样品处理方法简便、分析时间缩短和特异性强的鉴定硫磺熏蒸土茯苓药材的方法。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种检测经硫磺熏蒸的土茯苓或其制品的方法，包括以下步骤：

步骤一、制备经硫磺熏蒸的土茯苓或其制品的样品溶液a和未经硫磺熏蒸的土茯苓或其制品的样品溶液b；

步骤二、采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用的方法分别对样品溶液a和样品溶液b进行质谱数据采集，其中选用的碰撞电压为35～50V；

步骤三、将样品溶液a和样品溶液b的原始质谱数据进行预处理，对比确定样品溶液a相比于样品溶液b中出现的差异成分的质谱数据即为标志性硫化产物或其碎片的质谱数据；