[发明专利]检测经硫磺熏蒸的土茯苓及其制品的方法

权利要求书

1.一种检测经硫磺熏蒸的土茯苓或其制品的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、制备经硫磺熏蒸的土茯苓或其制品的样品溶液a和未经硫磺熏蒸的土茯苓或其制品的样品溶液b；

步骤二、采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用的方法分别对样品溶液a和样品溶液b进行质谱数据采集，其中选用的碰撞电压为35～50V；

步骤三、将样品溶液a和样品溶液b的原始质谱数据进行预处理，对比确定样品溶液a相比于样品溶液b中出现的差异成分的质谱数据即为包含标志性硫化产物或其碎片的质谱数据；

步骤四、制备未知的土茯苓或其制品的样品溶液c，并使用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用的方法采集质谱数据，对比包含标志性硫化产物或其碎片的质谱数据即可知土茯苓是否被熏蒸；

其中，步骤一后步骤二前还包括以下步骤：将样品溶液a和样品溶液b中分别加入含有1.0×10^-4mol/L邻苯二酚的PBS缓冲溶液，选用的PBS缓冲溶液的pH值均为7.4，磷酸根浓度均为0.1mol/L，并采用以玻碳电极为工作电极的三电极体系分别对加入了PBS缓冲溶液的样品溶液a和样品溶液b进行循环伏安法扫描，扫描的参数设置为：初始电位-0.4V、最高电位1V、最低点位-0.4V、最终电位-0.4V、扫描速率0.05V/s、扫描次数2次、灵敏度10^-4A/V、等待时间为2s；

其中，步骤二中进行超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用时，采取梯度洗脱的方式，梯度洗脱的A相为体积分数为0.1％的甲酸溶液，B相为乙腈，乙腈的比例变化为：5–10％B(0–1.0min)；10–12％B(1–2.5min)；12–25％B(2.5–7.0min)；25-35％B(7.0–7.5min)；35–48％B(7.5–11.5min)；48–70％B(11.5–12.0min)；70–90％B(12.0–13.0min)；90–5％B(13.0–13.1min)；5％B(13.1–15.0min)，使用的色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱2.1mm×100mm，1.8μm。

2.如权利要求1所述的检测经硫磺熏蒸的土茯苓或其制品的方法，其特征在于，步骤一中，样品溶液a和样品溶液b的制备方法具体为：取经硫磺熏蒸的土茯苓或其制品和未经硫磺熏蒸的土茯苓样品或其制品分别制成粉末，再使用体积分数为80％甲醇分别配置成溶液，使用超声波提取30min，冷却后继续加入相同体积分数的甲醇定容为10mg/ml的溶液，然后摇匀过滤，取续滤液即得样品溶液a和样品溶液b。

3.如权利要求1所述的检测经硫磺熏蒸的土茯苓或其制品的方法，其特征在于，步骤二中进行超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用时，采用负离子MS^E采集模式。

4.如权利要求1所述的检测经硫磺熏蒸的土茯苓或其制品的方法，其特征在于，步骤三中进行计算分析的参数设定为：保留时间范围为1-10min，质谱范围为m/z 100-1000，质量允许偏差设定为0.01Da，噪音消除水平为6.00，强度阈值设为100，质谱窗口设为0.02Da。

5.如权利要求1所述的检测经硫磺熏蒸的土茯苓或其制品的方法，其特征在于，步骤三中对样品溶液a和样品溶液b中出现的差异成分的质谱数据的分析方法为主成分分析法和正交偏最小二乘法，其中选取变量权重值VIP1的质谱数据为标志性硫化产物或其碎片的质谱数据。