[发明专利]一种Cas9核酸酶Q920P及其用途有效
| 申请号： | 201710347002.1 | 申请日： | 2017-05-16 |
| 公开（公告）号： | CN106947750B | 公开（公告）日： | 2020-12-08 |
| 发明（设计）人： | 吴强;李金环;寿佳 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N9/22 | 分类号： | C12N9/22;C12N15/55;C12N15/63;C12N15/10 |
| 代理公司： | 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 | 代理人： | 李艳;许亦琳 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 cas9 核酸酶 q920p 及其 用途 | ||
1.一种Cas9核酸酶用于制备CRISPR/Cas9系统的用途，所述Cas9核酸酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示，所述CRISPR/Cas9系统具有针对DNA双链进行切割产生突出断裂末端，通过细胞自身修复系统，以补平连接的方式加入与突出断裂末端互补的碱基功能，所述CRISPR/Cas9系统可用于基因组DNA片段编辑。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述Cas9核酸酶与野生型Cas9核酸酶相比，对目的基因组DNA片段进行切割时产生的突出断裂末端与钝断裂末端的比例不同。
3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述野生型Cas9核酸酶为SpCas9。
4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，所述野生型Cas9核酸酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示。
5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述编辑包括单位点编辑或多位点编辑，所述多位点编辑的编辑位点数为两个及以上。
6.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述编辑的方式包括突变、删除、反转或倒位、重复、易位或插入。
7.一种基因组DNA片段单位点编辑方法，利用CRISPR/Cas9系统，采用如权利要求1～5中任一项所述的Cas9核酸酶对DNA双链进行切割产生突出断裂末端，通过细胞自身修复系统，以补平连接的方式加入与突出断裂末端互补的碱基。
8.根据权利要求7所述的基因组DNA片段单位点编辑方法，其特征在于，所述方法可以改变单位点编辑时碱基突变的特征。
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