[发明专利]一种快速筛选砷离子核酸适配体的方法及应用

权利要求书

1.一种比色法筛选砷离子核酸适配体的反应体系，用于优化砷离子适配体序列及砷离子的检测应用，其特征在于，包括：

核酸序列；

纳米金溶液；以及

氯化钠溶液，

其中，所述核酸序列为

As-40：TTA CAG AAC AAC CAA CGT CGC TCC GGG TAC TTC TTC ATC G，

As-40-2：TTA CAG AAC AAC CAA CCC GGG TAC TTC TTC ATC G，

As-40-4：TAG GGA GAT ACC AGC，

As-40-6：TTA CAG AAC AAC CGG TAC TTC TTC ATC G中的任意一种。

2.根据权利要求1所述的比色法筛选砷离子核酸适配体的反应体系及检测应用，其特征在于：

其中，所述核酸适配体序列的浓度为0.01～1.00μmol/L。

3.根据权利要求1所述的比色法筛选砷离子核酸适配体的反应体系及检测应用，其特征在于：

其中，所述纳米金溶液的浓度为10～20nmol/L。

4.根据权利要求1所述的比色法筛选砷离子核酸适配体的反应体系及检测应用，其特征在于：

其中，所述氯化钠溶液的浓度为0.1～0.9mol/L。

5.根据权利要求1所述的比色法筛选砷离子核酸适配体的反应体及检测应用，其特征在于：

其中，所述核酸序列为5’-TTA CAG AAC AAC CAA CGT CGC TCC GGG TAC TTC TTC ATC G-3’。

6.一种使用权利要求1-5中任意一项所述的比色法筛选砷离子核酸适配体的反应体系及检测应用，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一，在向50μL所述纳米金溶液中加入50μL 0.01～1.00μmol/L的核酸适配体溶液后混匀；

步骤二，将步骤一所得到的混合溶液和50μL已知浓度(0.01～1mmol/L)的亚砷酸钠溶液混匀，室温反应5min；

步骤三，将步骤二所得到的混合溶液和10μL 0.1-0.9mol/L的氯化钠溶液混匀，室温反应5min，并测定该混合溶液在特定波长可见光的吸光度比值，与步骤二所述亚砷酸钠的浓度相对应，得到砷离子浓度-吸光度比值标准曲线；

步骤四，将另外待筛选的核酸适配体溶液替换步骤二中的适配体溶液，重复步骤一、二、三，得到该适配体反应体系中的颜色变化照片以及对应的砷离子浓度-吸光度比值标准曲线；

步骤五，比较四种适配体反应体系的颜色变化以及砷离子浓度-吸光度比值标准曲线，可获得最适合检测砷离子的适配体。

步骤六，将未知浓度的砷离子溶液替换步骤二中已知浓度的亚砷酸钠溶液，重复步骤一、二、三，得到其在特定波长可见光的吸光度比值，根据该适配体体系的砷离子浓度-吸光度比值标准曲线，可获得待测溶液中的砷离子浓度。

7.根据权利要求6所述的砷离子浓度检测的方法，其特征在于：

其中，步骤二和步骤三中混合的时间为5min，温度为室温25℃。

8.根据权利要求6所述的砷离子浓度检测的方法，其特征在于：

其中，步骤三中的吸光度比值测定的波长为650nm、520nm，吸光度比值为A650/A520。

9.权利要求1-5中任意一项所述的比色法检测砷离子的核酸序列反应体系在检测砷离子浓度中的应用，其特征在于：

其中，所述砷离子为水溶液中的正三价砷离子，其浓度为0.01-1.00mmol/L。