[发明专利]一种套叶兰离体培养快繁方法

权利要求书

1.一种套叶兰离体培养快繁方法，其特征在于：包括依次进行的如下步骤：获取套叶兰植株的外植体、外植体诱导培养、根状茎的增殖培养、根状茎的分化培养、壮苗培养、炼苗和移栽；其中，所述的外植体诱导培养操作的外植体诱导培养基包括：KC培养基、0.5～1.0mg/L 6-BA、0.01～0.05mg/L ZT、0.1～1.0mg/L IBA、15～25g/L蔗糖、3.5～5.0g/L琼脂、30～50ml/L椰子汁，pH为5.4～5.8；所述的根状茎的增殖培养操作所用到的增殖培养基包括：MS、0.1～0.5mg/L 6-BA、0.05～0.1mg/L NAA、0.01～0.05mg/L KT、15～25g/L蔗糖、3.5～4.5g/L琼脂、0.1～0.2g/L活性炭、10～20ml/L椰子汁，pH为5.4～5.8；所述的根状茎的分化培养操作所用到的分化培养基包括：MS、0.5～2.0mg/L NAA、0.1～0.5mg/L 6-BA、30～35g/L蔗糖、3.5～4.0g/L琼脂、0.05～0.1g/L活性炭，pH为5.4～5.8；所述的壮苗培养所用到的壮苗培养基包括：1/2MS、0.5～1.0mg/L NAA、0.1～0.5mg/L GGR-6、15～20g/L蔗糖、3.5～4.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。

2.根据权利要求1所述的套叶兰离体培养快繁方法，其特征在于：所述的外植体诱导培养操作的方法为：将采集得到的作为外植体的叶兰植株消毒后纵向切成0.3～0.5cm的芽点，接种到诱导培养基中暗培养90～120天即可诱导形成长度为2～3cm的根状茎。

3.根据权利要求1所述的套叶兰离体培养快繁方法，其特征在于：所述的根状茎的增殖培养操作具体为：将外植体诱导培养操作得到的根状茎切成长0.5～1.0cm的茎段并接种到增殖培养基中培养40～50天即可获得长度为4～6cm的根状茎。

4.根据权利要求1所述的套叶兰离体培养快繁方法，其特征在于：所述的根状茎的分化培养操作的方法为：从根状茎的增殖培养得到增殖后的根状茎切成长度为1.5～2.0cm的茎段并接种到分化培养基中培养50～60天即能分化出试管小苗。

5.根据权利要求1所述的套叶兰离体培养快繁方法，其特征在于：所述的壮苗培养操作的方法为：将经过根状茎的分化培养操作得到的试管小苗根部粘连的根状茎切除并将小苗转接至壮苗培养基中培养30～45天即可获得高3～5cm的套叶兰试管苗。

6.根据权利要求1所述的套叶兰离体培养快繁方法，其特征在于：所述的炼苗和移栽的具体操作为：将经壮苗培养操作所得的套叶兰试管苗在温室的自然光下打开组培瓶盖子炼苗1～2天，洗净根部的培养基后在温室自然晾干至根系发白，在体积比为2:2:1的树皮、兰石、泥岩的混合基质中栽培成苗即为套叶兰种苗。

7.根据权利要求1-6任一所述的套叶兰离体培养快繁方法，其特征在于：根状茎的增殖培养操作、根状茎的分化培养操作、壮苗培养操作中培养条件均为：培养温度为25～28℃，光照强度为1500～2000lx，光照时间为12～15小时/天；外植体诱导培养操作中培养温度为25～28℃。